[发明专利]将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法有效
| 申请号： | 201410433182.1 | 申请日： | 2014-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN105372318B | 公开（公告）日： | 2018-01-05 |
| 发明（设计）人： | 国前;于金明;廖湘鲁 | 申请（专利权）人： | 山东省肿瘤医院 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;G01N15/14 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人： | 赵妍 |
| 地址： | 250117 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞 原位 电泳 分析 结合 固定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）取待检测的细胞团加入4%的多聚甲醛预固定1-6秒钟，终止固定；
（2）将预固定后的细胞团中加入0.2% Triton X-100 200μL进行细胞打孔5-15分钟；
（3）将打孔后的细胞用PBS冲洗后，将冲洗后的细胞中加入电泳缓冲液制成细胞悬液；
（4）恒压条件下进行电泳，电泳完成后收集电泳缓冲液，将收集到的电泳缓冲液用70%的乙醇固定，固定22-26h。
2.如权利要求1所述的固定方法，其特征在于，所述步骤（1）固定3 秒。
3.如权利要求1所述的固定方法，其特征在于，所述步骤（2）打孔时间为10 分钟。
4.如权利要求1所述的固定方法，其特征在于，所述步骤（3）中电泳缓冲液为三羟甲基氨基甲烷Tris: 25 mM; 甘氨酸Glycine: 192 mM; 葡萄糖Glucose: 43.2 mM；pH8.3。
5.如权利要求1所述的固定方法，其特征在于，所述步骤（4）中固定为24h。
6.如权利要求1所述的固定方法，其特征在于，所述步骤（3）中PBS 的pH 为7.4。
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