[发明专利]一种CETP抑制剂的分离检测方法

说明书

技术领域

本申请涉及药物化学领域，具体涉及合成抑制胆固醇酯转移蛋白(CETP)的化合物的方法。

背景技术

中国专利申请CN 200580022618.7公开一系列胆固醇酯转移蛋白抑制剂(CETP)，其中安塞曲匹，可以增加高密度脂蛋白(HDL)胆固醇和载脂蛋白A1，并减少低密度脂蛋白(LDL)胆固醇和载脂蛋白B，可以潜在治疗血脂异常并预防动脉粥样硬化。安塞曲匹其化学名称为(4S，5R)-5-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-3-{[4′-氟-5′-异丙基-2′-甲氧基-4-(三氟甲基)联苯基-2-基]甲基}-4-甲基-1，3-噁唑烷-2-酮，其化学结构如式(1)所示：

安塞曲匹的分子中存在2个手性中心，因此，存在一个对映异构体杂质以及两个非对映异构体。在生产安塞曲匹的过程中需要进行质量控制，但目前，《美国药典》USP、《欧洲药典》EP及《中国药典》Ch.P.均没有收载安塞曲匹，也未查到有关文献报道安塞曲匹及其异构体的分离检测方法。为了更好更准确的控制产品中异构体的含量，保证原料药以及制剂产品的质量，发明人开发了适合于安塞曲匹原料药的异构体含量测定的分析方法。本发明的方法能简单、快速、准确地分离、检测出安塞曲匹及其异构体杂质。

发明内容

目前，未发现对安塞曲匹光学异构体分析方法的报道，我们经过反复试验以及研究，用CHIRALPAK AD-H手性色谱柱(250*4.6mm)为分离色谱柱，以正己烷：异丙醇＝95:5(V/V)为流动相，可以将安塞曲匹与其3个光学异构体进行基线分离，可以有效控制安塞曲匹异构体杂质以及非对映异构体的的含量。本发明的方法能简单、快速、准确的分离检测出安塞曲匹及其光学异构体。

术语定义

术语“安塞曲匹”是指(4S，5R)-5-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-3-{[4′-氟-5′-异丙基-2′-甲氧基-4-(三氟甲基)联苯基-2-基]甲基}-4-甲基-1，3-噁唑烷-2-酮。

在本发明上下文中，无论是否使用“大约”或“约”等字眼，所有在此公开了的数字均为近似值。每一个数字的数值有可能会出现1％，2％，5％或10％等的差异。

发明详述

一种分离检测安塞曲匹及其异构体的方法，其特征在于，用填料为涂覆直链淀粉类或键合纤维素类的手性色谱柱为分离色谱柱，以低级烷烃和/或醇类溶剂为流动相。

在一些实施例中，所述的手性色谱柱为CHIRALPAK AD-H。

在一些实施例中，所述的低级烷烃为正己烷、环己烷、正戊烷、正庚烷的一种或几种。

在一些实施例中，所述的醇类溶剂为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇的一种或几种。

在一些实施例中，所述低级烷烃与醇类溶剂的体积比为100:0至80：20，在某些实施例中,低级烷烃与醇类溶剂的体积比为95:5。

在一些实施例中，所述的流动相为正己烷和异丙醇，其体积比为95:5。

进一步地，为了实现本发明的分离检测，本发明采用以下检测仪器及检测条件：

色谱柱为CHIRALPAK AD-H。

检测器为DAD检测器，检测波长230nm-270nm，优选250nm。

流速为0.3-1.1ml/min，优先0.6mL/min。

柱温为20-40℃，优先30℃。

进样量为2-30μL，优选15μL。

运行时间为80分钟以内。

供试液配制：用稀释剂将供试品配制成0.3-5mg/ml，优选1mg/ml的溶液。

在一些实施例中，安塞曲匹及其异构体的分离检测包括以下步骤：

a)取一定量的安塞曲匹及其异构体混合物，用正庚烷作为稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液,

b)取供试品溶液，按如下的条件进行高效液相色谱分析：

以CHIRALPAK AD-H(4.6x 250mm)为分离柱；紫外检测波长为250nm；

流动相为正己烷：异丙醇＝95:5(V/V)；

柱温30℃；

进样体积为15μL；

流速0.6ml/min；

c)记录色谱图。

本发明所述的分离检测方法，安塞曲匹出峰位置保留时间(RT)约为10.2min，其对映异构体RT约为8.4min，其非对映异构体的RT约为9.0min和约为11.9min。