[发明专利]一种利用高效逆流色谱纯化醉椒素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物提纯领域，涉及一种利用高效逆流色谱纯化醉椒素的方法。

背景技术

草药疗法在治疗的同时更注重养身，目前草药疗法已在世界各国比较流行，欧亚许多国家用草药制成补充物投入市场，据研究统计，在美国，大约有500万人服用各种草药制成的补充物。

胡椒科植物卡瓦胡椒中的醉椒素具有抗焦虑、镇静催眠、局部麻醉、抗惊厥等作用 ,且未观察到药物依赖性等优点而在欧洲和美国临床应用。早在1990年，德国联邦卫生局就批准卡瓦胡椒用于治疗焦虑症，目前英国将其收入《植物药典》，美国将其收入新版《美国药典》，欧美许多国家将卡瓦胡椒列为非处方药或处方药。

目前国内现有的提取醉椒素的工艺很少，如专利《卡瓦胡椒提取物及其制备方法》(申请号200810057147.9)中公开的工艺步骤是将卡瓦胡椒分拣-清洗-干燥-粉碎-醇提，残渣重复一次上述步骤，提取液减压浓缩，混合粉碎即得卡瓦胡椒提取物。该方法提取醉椒素产品纯度太低，不适合用于药物合成。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用高效逆流色谱纯化醉椒素的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种利用高效逆流色谱纯化醉椒素的方法，其特征在于包括以下步骤：

a.取卡瓦胡椒干燥品粉碎过40目筛，加8-10倍量乙醇超声提取，加入活性炭脱色，过滤；

b.滤液超滤除杂，纳滤浓缩，放置析出结晶；

c.将上述浓缩液以乙酸乙酯-乙醇-水为溶剂系统，用高效逆流色谱分离，根据ELSD检测图收集目标流分。

所述步骤a中，乙醇浓度80%-90%，活性炭量为溶液量的1%-5%，超声频率为40-65KHz，超声时间为20-60min，提取1-2次。

所述步骤b中，超滤膜为10000-30000D的中空纤维式聚砜膜，进口压力为0.1-0.3MPa，纳滤膜为200-300D的中空纤维式聚砜膜，进口压力为1.0-2.2MPa。

所述步骤c中，乙酸乙酯-乙醇-水的比例为2-3：4-6：3-5，上相为流动相，下相为固定相。

所述步骤c中，将固定相充满逆流色谱柱，调整主机转速800-1000rpm，再将流动相泵入色谱柱，平衡后调整流速1-3ml/min，同时取流动相溶解粗浓缩液，进样阀进样。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：

取干燥的卡瓦胡椒1kg，粉碎，过40目筛，加入8倍量80%的乙醇超声提取30min，提取2次，超声频率为40KHZ，加入溶液量1%活性炭脱色，过滤。滤液先后经10000D中空纤维式聚砜膜超滤除杂，进口压力为0.1MPa，200D中空纤维式聚砜膜纳滤浓缩，进口压力为1.0MPa，得到浓缩液。

将乙酸乙酯-乙醇-水按2：4：3体积比混合，超声摇匀，静置分层后分离，下相为固体相，上相为流动相，浓缩液用上相溶解，将固定相泵满色谱柱，然后调整主机转速为800rmp，再以3ml/min流速泵入流动相，待柱内溶剂系统建立动态平衡后，由进样阀进样，然后根据检测器谱图接收目标流分，蒸干即得醉椒素产品13.8g，含量95.3%。

实施例2：

取干燥的卡瓦胡椒2kg，粉碎，过40目筛，加入10倍量90%的乙醇超声提取40min，提取1次，超声频率为60KHZ，加入溶液量3%活性炭脱色，过滤。滤液先后经经20000D中空纤维式聚砜膜超滤除杂，进口压力为0.3MPa，300D中空纤维式聚砜膜纳滤浓缩，进口压力为2.2MPa，得到浓缩液。

将乙酸乙酯-乙醇-水按3：6：5体积比混合，超声摇匀，静置分层后分离，下相为固体相，上相为流动相，浓缩液用上相溶解，将固定相泵满色谱柱，然后调整主机转速为1000rmp，再以2ml/min流速泵入流动相，待柱内溶剂系统建立动态平衡后，由进样阀进样，然后根据检测器谱图接收目标流分，蒸干即得醉椒素产品31.2g，含量97.4%。