[发明专利]一种大批量开发苎麻基因组SNP标记的方法及其开发的引物有效
申请号: | 201410450212.X | 申请日: | 2014-09-05 |
公开(公告)号: | CN104212898A | 公开(公告)日: | 2014-12-17 |
发明(设计)人: | 陈建华;栾明宝;王晓飞;许英;孙志民;刘晨晨 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院麻类研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 袁靖 |
地址: | 410205 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大批量 开发 苎麻 基因组 snp 标记 方法 及其 引物 | ||
1.一种大批量开发苎麻基因组SNP标记的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
(1)提取2个苎麻品种的DNA;
(2)将苎麻基因组DNA酶切为小片段;
(3)对酶切后获取的小片段进行测序,获得2个品种的SLAF标签;
(4)在步骤(3)获得的2个苎麻品种的SLAF标签中,搜寻具有SNP多态性的SLAF标签;
(5)对搜寻到的SLAF标签序列进行引物设计,经扩增测序检测,得到的引物即为基因组SNP标记。
2.根据权利要求1所述的大批量开发苎麻基因组SNP标记的方法,其特征在于,步骤(2)中采用RsaI酶对苎麻基因组进行酶切。
3.根据权利要求2所述的大批量开发苎麻基因组SNP标记的方法,其特征在于,酶切后获取长度为214-314bp的片段。
4.根据权利要求1所述的大批量开发苎麻基因组SNP标记的方法,其特征在于,步骤(4)中根据等位基因数和基因序列之间的差异进行多态性分析,搜寻具有SNP多态性的SLAF标签。
5.根据权利要求1所述的大批量开发苎麻基因组SNP标记的方法,其特征在于,步骤(5)的引物设计参数:扩增产物长度在100-180bp,引物长度在18-25bp。
6.根据权利要求1或2或3或4或5所述的大批量开发苎麻基因组SNP标记的方法,其特征在于,设计并经扩增测序检测的10对基因组SNP引物序列如下:
7.用于苎麻基因组SNP标记的引物,其特征在于,10对基因组SNP标记引物序列如下:
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