[发明专利]一种闪蒸气相色谱-质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法

权利要求书

1.一种闪蒸气相色谱-质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

(1)取产地不同的北五味子和南五味子样品，北五味子和南五味子分别各取5～15个样品，一共取n个样品；n为整数，10≤n≤30；

(2)各样品分别烘干、研磨得五味子粉末，每种样品的五味子粉末分别装入裂解器中，将裂解器置于气相色谱仪进样口处，当裂解器温度达到300-350℃时进样，用气相色谱-质谱联用仪检测，得到气相色谱图和质谱图；采用质谱标准谱库对五味子化学成分进行定性；

所述气相色谱条件为：色谱柱为弱极性柱，升温程序为初温50℃，以5～10℃/min速率升到300℃，保持5～15min；进样口温度为280～320℃，检测器温度为280～320℃，分流比30～50:1；载气为氮气或氦气，流速1.0mL/min；

质谱条件为：电子轰击离子源，离子源温度230～250℃，传输线温度250～300℃，电离能量70eV，离子扫描范围40～550m/z；

裂解器条件：裂解炉温度：300-350℃；裂解器与气相色谱仪接口温度300～350℃；

(3)按照气相色谱图的流出时间和质谱定性结果，将各样品气相色谱图按照流出时间的先后顺序依次分为四个区域：A区、B区、C区、D区，其中A区为小分子化合物区，B区为萜类化合物区，C区为脂肪酸和脂肪酸酯区，D区为木脂素区；所有北五味子样品在B区和D区中各选取其中峰面积最高的5-10个成分，所有南五味子样品在B区和D区中各选取其中峰面积最高的5-10个成分，取上述北五味子与南五味子选取的所有成分的并集，得到M个特征成分；M为整数，10≤M≤40；

所述A区为小分子化合物区，所述小分子化合物是指分子量在200以下的胺类、酸类、酸酐类、醇类、酯类和醛类的化合物；

所述B区为萜类化合物区，所述萜类化合物包括萜烯化合物和含氧萜烯化合物；

所述C区为脂肪酸和脂肪酸酯区，所述脂肪酸是指C16～C20的脂肪酸，所述脂肪酸酯是指C18～C36的脂肪酸酯；

(4)待鉴别的x个五味子样品按照步骤(2)操作，得到气相色谱图和质谱图；并进行定性和定量分析；x为整数，1≤x≤10；

(5)取n个已知样品和x个待鉴别样品的气相色谱图，取每个样品的M个特征成分的特征峰相对于其五味子甲素峰的相对峰面积数据，得到M×(n+x)的数据库，输入SPSS统计软件，进行主成分分析、聚类分析或相似度计算，根据统计分析结果将待鉴别样品归类为北五味子或南五味子。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(5)中，所述主成分分析按以下方法进行：

取n个已知样品的气相色谱图，取每个样品的M个特征成分的特征峰相对于其五味子甲素峰的相对峰面积数据，得到M×n的数据库，输入SPSS统计软件进行主成分分析，提取得到2个主成分，得到每种样品的二维主成分坐标，并由此做出已知样品的二维主成分分析散点图；二维主成分分析散点图上南五味子样品和北五味子样品分为两个区域，分别为南五味子区和北五味子区；

取n个已知样品和x个待鉴别样品的气相色谱图，取每个样品的M个特征成分的特征峰相对于其五味子甲素峰的相对峰面积数据，得到M×(n+x)的数据库，输入用SPSS统计软件进行主成分分析，提取得到2个主成分，得到每种样品的二维主成分坐标，并由此做出所有样品的二维主成分分析散点图；所有样品的二维主成分分析散点图上，已知南五味子样品和北五味子样品分为两个区域，分别为南五味子区和北五味子区；根据待鉴别样品的二维主成分坐标在二维主成分分析散点图中的位置，待鉴别样品靠近南五味子区，鉴定为南五味子；待鉴别样品的坐标靠近北五味子区，鉴定为北五味子。