[发明专利]一种闪蒸气相色谱-质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种鉴别北五味子和南五味子的方法，特别涉及一种闪蒸气相色谱-质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法。

(二)背景技术

五味子系木兰科(Magnoliacae)五味子属多年附生草本植物五味子(Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.)或华中五味子(Schisandrae sphenanthera Rehd.et Wils.)的干燥成熟果实。北五味子主要产于黑龙江、吉林和辽宁三省，其余产地均归为南五味子。五味子主要含有木脂素、挥发油、粗多糖和脂肪酸等多种化学成分，药用价值很高，传统医学认为其具有敛肺生津，补肾养心，收敛固涩之功效。一般认为，五味子的生物活性主要来自木脂素、挥发油中的萜烯及其衍生物等。

五味子的不同组成部分一般通过不同的方法分别测定：如五味子挥发油的分析通过气相色谱完成，木脂素类的分析通过液相色谱。这就需要分别处理样品，得到不同的组成成份分别进行鉴定，前处理操作复杂，需消耗大量时间和有机溶剂，较难反应五味子整体化学成分的组成和特征。目前，尚未见五味子闪蒸气相色谱质谱分析的有关报道，故本发明建立了一种能全面反映五味子中中的挥发油和木脂素等部分化学组成的闪蒸色谱质谱分析方法，并结合指纹图谱鉴别五味子品种，具有重要的学术研究价值及实际应用价值。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种利用闪蒸气相色谱-质谱法对五味子中挥发油和木脂素等所含化学成分的定性、定量分析的方法，并在此基础上对五味子各部分含量高低进行比较，最后通过指纹图谱模式识别来鉴别北五味子和南五味子；本发明建立了五味子的闪蒸气相色谱-质谱的整体分析方法，针对不同产地五味子挥发油和木脂素的相对含量，通过指纹图谱识别对北五味子和南五味子进行鉴别。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种闪蒸气相色谱-质谱法结合指纹图谱鉴别北五味子和南五味子的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)取产地不同的北五味子和南五味子样品，北五味子和南五味子分别各取5～15个样品，一共取n个样品；n为整数，10≤n≤30；

(2)各样品分别烘干、研磨得五味子粉末，每种样品的五味子粉末分别装入裂解器中，将裂解器置于气相色谱仪进样口处，当裂解器温度达到300-350℃时进样，用气相色谱-质谱联用仪检测，得到气相色谱图和质谱图；采用质谱标准谱库对五味子化学成分进行定性；

所述定性方法为：根据质谱标准谱库检索结果进行定性(通俗点讲就是质谱库中匹配度较高的物质)；所述质谱标准谱库为Nist02库；

所述气相色谱条件为：色谱柱为弱极性柱，升温程序为初温50℃，以5～10℃/min(优选10℃/min)速率升到300℃，保持5～15min(优选10min)；进样口温度为280～320℃(优选300℃)，检测器温度为280～320℃(优选300℃)，分流比30～50:1；载气为氮气或氦气，流速1.0mL/min；

质谱条件为：电子轰击离子源，离子源温度230～250℃，传输线温度250～300℃，电离能量70eV，离子扫描范围40～550m/z；

裂解器条件：裂解炉温度：300-350℃；裂解器与气相色谱仪接口温度300～350℃；

(3)按照气相色谱图的流出时间和质谱定性结果，将气相色谱图按照流出时间的先后顺序依次分为四个区域：A区、B区、C区、D区，其中A区为小分子化合物区，B区为萜类化合物区，C区为脂肪酸和脂肪酸酯区，D区为木脂素区；所有北五味子样品在B区和D区中各选取其中峰面积最高的5-10个成分，所有南五味子样品在B区和D区中各选取其中峰面积最高的5-10个成分，取上述北五味子与南五味子选取的所有成分的并集，得到M个特征成分；M为整数，10≤M≤40；

所述A区为小分子化合物区，所述小分子化合物是指分子量在200以下的胺类、酸类、酸酐类、醇类、酯类、醛类的化合物；

所述B区为萜类化合物区，所述萜类化合物包括萜烯化合物和含氧萜烯化合物。

所述C区为脂肪酸和脂肪酸酯区，所述脂肪酸是指C16～C20的脂肪酸，所述脂肪酸酯是指C18～C36的脂肪酸酯；

A、B、C三区可以总称为挥发油区；

(4)待鉴别的x个五味子样品按照步骤(2)操作，得到气相色谱图和质谱图；并进行定性和定量分析；x为整数，1≤x≤10；