[发明专利]药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法

权利要求书

1.药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，依次包括以下步骤：

(1)外植体的选择与接种：选用菊叶薯蓣幼嫩器官经组织培养获得的2～3cm高且生长健壮、长势均匀、品质良好的无菌试管苗为材料；然后将菊叶薯蓣无菌试管苗的叶片接种在MS大量+2×MS微量+MS有机+2×MS铁盐+6-BA1.0～5.0mg/L+NAA0.2～0.8mg/L+IBA0.2～0.8mg/L+GA₃0.1～0.8mg/L+3％蔗糖+0.75％琼脂固体培养基上，获得根叶俱全的试管苗；

(2)增殖生根：将步骤(1)获得的不定芽转接在MS+6-BA0.1～1.0mg/L+NAA0.2～0.8mg/L+IBA0.2～0.8mg/L+GA₃0.1～0.8mg/L+矮壮素0.5～1.0mg/L+3％蔗糖+0.75％琼脂的琼脂固体培养基上进行增殖和生根；

(3)试管苗移栽：试管苗出瓶移栽前，将根叶俱全的幼苗分成单株，出瓶的幼苗先用500～800倍的多菌灵或代森锰锌浸泡10～15分钟，随后将幼苗移至有顶玻璃的移栽容器中，在温度为20～30℃，湿度80～90％的条件下生长，25～30d长出新叶时，既已成活；

(4)大田块茎繁育：将移栽成活的幼苗，在自然条件炼苗3～5d后，移栽至大田进行块茎繁育。

2.根据权利要求1所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)使用的培养基：MS大量+2×MS微量+MS有机+MS铁盐+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L+IBA0.2mg/L+GA₃0.1mg/L+3％蔗糖+0.75％琼脂。

3.根据权利要求1所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)使用的培养基：MS大量+2×MS微量+MS有机+MS铁盐+6-BA3.0mg/L+NAA0.6mg/L+IBA0.3mg/L+GA₃0.3mg/L+3％蔗糖+0.75％琼脂。

4.根据权利要求1或2或3所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)中将无菌试管苗外植体叶片按1～2cm×1～2cm分成小块。

5.根据权利要求1所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(2)使用的培养基：MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L+IBA0.2mg/L+GA₃0.1mg/L+矮壮素1.0mg/L+3％蔗糖+0.75％琼脂。

6.根据权利要求1所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(2)使用的培养基：MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.3mg/L+IBA0.3mg/L+GA₃0.1mg/L+矮壮素1.0mg/L+3％蔗糖+0.75％琼脂。

7.根据权利要求1或5或6所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)叶片诱导出的不定芽增殖生根时，新芽茎段或顶芽去掉新叶，再分成1节1芽转入增殖生根培养基中增殖生根。

8.根据权利要求7所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，去掉的新叶又按照步骤(1)的方法接种。

9.根据权利要求7所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，增殖生根时每隔25～30d继代一次。

10.根据权利要求1或2或3或5或6所述的药用菊叶薯蓣组培一步成苗批量化生产的方法，其特征在于，步骤(1)和(2)的培养温度为24℃±2，1000～2000lx弱光环境中，每天10～12小时光照培养。