[发明专利]一种乌饭树悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
| 申请号： | 201410463185.X | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104255474A | 公开（公告）日： | 2015-01-07 |
| 发明（设计）人： | 杨存 | 申请（专利权）人： | 南京通泽农业科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乌饭树 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
1. 一种乌饭树悬浮细胞培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养，其主要步骤如下：
（1）采取乌饭树幼嫩的叶片，在超净工作台上对其进行消毒处理；
（2）取步骤（1）消毒处理过的叶片接种入改良MS+2,4-D3-5mg/L+6-BA0.4mg/L+活性炭1g/L+3%蔗糖+0.65%琼脂培养基中进行愈伤组织诱导，光照强度800lx，光期6h，暗期18h；
（3）取步骤（2）中诱导出来的乌饭树愈伤组织接入改良MS+CH200mg/L+IAA0.3mg/L+ IBA0.2mg/L+6-BA1-2mg/L+3%蔗糖+0.65%琼脂进行愈伤组织的增殖，pH5.8，光照2000lx，温度28℃；
（4）取步骤（3）增殖后的愈伤组织筛选嫩绿松散的愈伤组织接入液体培养基改良MS+硫代硫酸钠8mg/L+IAA3mg/L+2ip0.05-0.1mg/L+5mL/L蜂蜜，45继代三次后称重计算增殖率。
2. 按照权利要求1所述的一种乌饭树悬浮细胞培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述乌饭树无菌叶片的获得为，取乌饭树近芽处幼嫩的叶片，在漂白粉中浸泡2min，毛刷去除表面被毛和污垢，流水冲洗20min，超净工作台上10%安替福民溶液消毒8min，同时均匀摇动，无菌水冲洗6-7遍，吸水纸吸去表面水分。
3. 按照权利要求1所述的一种乌饭树悬浮细胞培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（3）中培养基中附加了CH，可促进愈伤组织的分裂生长。
4. 按照权利要求1所述的一种乌饭树悬浮细胞培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4）液体悬浮培养中附加了硫代硫酸钠和蜂蜜，硫代硫酸钠可以防止愈伤主治的褐化，蜂蜜可以促进悬浮细胞的生长。
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