[发明专利]一种堡树酮的制备方法及抗肿瘤应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种植物提取物的制备方法及应用，特别涉及一种堡树酮的制备方法及抗肿瘤应用。

背景技术

堡树酮（Castelanone）是一种苦木素类活性物质，来源于苦木科(Simaroubaceae) 特氏堡树Castela tweedii的根皮，mp237-239℃，分子式为C25H34O9，分子量为478.54，结构式为：

 

堡树酮对KB细胞有细胞毒活性；对鲁斯氏肉瘤病毒诱发的细胞转移有抑制作用，在浓度为0.15～1μg/mL时对病灶的抑制率为76%-99%，而对正常细胞的生长没有影响。

通过文献检索，国内尚未见堡树酮在抗肿瘤药物中的应用。

发明内容

为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，，提供一种堡树酮的制备方法及抗肿瘤应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种堡树酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）取特氏堡树的根皮，经粉碎处理，加5-12倍60-90%乙醇溶液在20-45℃的温度下进行连续逆流超声提取30-100min，过滤，得到提取液；

（2）提取液通过截留分子量为1000-3000的超滤膜超滤和截留分子量为100-500的纳滤膜浓缩，操作压力为0.5-2.8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；

（3）采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的堡树酮，其两相溶剂系统为环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集堡树酮组分；

（4）将堡树酮组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入85%甲醇回流溶解，放置重结晶，过滤、洗涤干燥即得堡树酮。

步骤（1）中超声频率为35-60KHz。

步骤（3）中环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统的体积比为5-7:2-4:4-7:1-3。

所述制备的堡树酮，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。

采用本法制备堡树酮，工艺简便易操作，制备量大，产品得率高，而且低污染；添加肠吸收促进剂，有利于提高生物利用度。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

堡树酮的制备

将特氏堡树的根皮粉碎，取1kg，用12kg75%乙醇溶液进行超声提取，超声频率为30KHz，提取3次，每次0.5h，提取液浓缩干燥，得到特氏堡树的根皮乙醇粗提物，用乙酸乙酯对粗提物进行萃取，过滤，滤液减压浓缩，得到浓缩液，与少量硅胶拌样后，挥干溶剂，上硅胶柱，二氯甲烷-甲醇按体积比10:1、6:1、1:1梯度洗脱，TLC跟踪监测，收集堡树酮洗脱液，洗脱液浓缩注入高速逆流色谱仪，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水5:3:8:4为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，主机转速为800rpm，流动相流速为3ml/min，根据检测器谱图收集堡树酮流分，浓缩，冷冻干燥即得堡树酮1.4g，HPLC检测含量为96.7%。

 

实施例2：

堡树酮的制备

将特氏堡树的根皮粉碎，取1kg，用10kg70%乙醇溶液进行超声提取，超声频率为25-40KHz，提取2次，每次1.5h，提取液浓缩干燥，得到特氏堡树的根皮乙醇粗提物，用乙酸乙酯对粗提物进行萃取，过滤，滤液减压浓缩，得到浓缩液，与少量硅胶拌样后，挥干溶剂，上硅胶柱，二氯甲烷-甲醇按体积比11:1、5:1、1:1梯度洗脱，TLC跟踪监测，收集堡树酮洗脱液，洗脱液浓缩注入高速逆流色谱仪，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水5:5:8:4为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，主机转速为750rpm，流动相流速为3.5ml/min，根据检测器谱图收集堡树酮流分，浓缩，冷冻干燥即得堡树酮1.9g，HPLC检测含量为97.2%。

 

实施例3：

堡树酮的制备