[发明专利]兰香草酮的制备方法及其在抗白血病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种植物提取物的制备方法及应用，特别涉及兰香草酮的制备方法及其在抗白血病药物中的应用。

背景技术

兰香草酮（Incanone），CAS号180282-91-1，分子式C₂₀H₂₈O₅，分子量348.46，结构式为

 

兰香草酮来源于马鞭草科(Verbenaceae) 兰香草 Caryopteris incana(Thunb.)Miq.的全植物。研究表明，兰香草酮具有细胞毒活性，对人型白血病细胞HL60呈显著的细胞毒活性，IC50为6μM。

白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他组织和器官，同时正常造血受抑制。临床可见不同程度的贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和骨骼疼痛。据报道，我国各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位。

发明内容

为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，提供一种兰香草酮的制备方法及其在抗白血病药物中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

兰香草酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）取兰香草粉碎，加生物酶酶解8-10小时，酶解原料加60-80%乙醇溶液微波或超声提取2-3次，提取液浓缩至浸膏；

（2）将提取浸膏加适量水分散后加入大孔树脂柱中吸附，先用水洗脱，再用50-70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；

（3）将洗脱液浓缩后采用制备型液相色谱分离，紫外在线检测，收集目标成分，低温干燥即得兰香草酮。

步骤（1）中所述生物酶可选果胶酶、纤维素酶和淀粉酶中的任一种，用量为原料重量的0.2-0.5%。

步骤（2）中所述大孔树脂可选NK-9、ADS-21和HPD417中的一种。

步骤（3）中所述制备型高效液相色谱中流动相为30-40%的乙腈溶液。

所述制备的兰香草酮，在制备抗白血病药物中的应用，尤其在制备防治淋巴性白血病和髓细胞白血病的应用。

所述制备的兰香草酮，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。

采用本法制备兰香草酮，工艺简便易操作，制备量大，产品得率高，而且低污染；添加肠吸收促进剂，有利于提高生物利用度。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

兰香草酮的制备

将兰香草粉碎，过20目筛，称取1kg投入提取罐中，称取2.2g纤维素酶溶解在7LpH4.5的水溶液中加入提取罐，在50℃条件下酶解10小时，升温至80℃灭酶，过滤，将酶解原料加10倍量70%乙醇溶液，在50℃条件下微波提取3次，过滤得到提取液，减压浓缩至浸膏，加水分散，加入NK-9大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱，再取3BV50%乙醇洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏。将浸膏用甲醇溶解，注入制备型高效液相色谱仪，乙腈-水（30：70）为流动相，紫外在线检测，收集高浓度流分，旋转蒸发浓缩、低温干燥即得1.1g兰香草酮，含量96.4%。

实施例2：

兰香草酮的制备

将兰香草粉碎，过20目筛，称取1kg投入提取罐中，称取2.8g果胶酶溶解在7LpH4.5的水溶液中加入提取罐，在50℃条件下酶解8小时，升温至80℃灭酶，过滤，将酶解原料加6倍量60%乙醇溶液，在50℃条件下超声提取3次，过滤得到提取液，减压浓缩至浸膏，加水分散，加入ADS-21大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱，再取4BV60%乙醇洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏。将浸膏用甲醇溶解，注入制备型高效液相色谱仪，乙腈-水（33:67）为流动相，紫外在线检测，收集高浓度流分，旋转蒸发浓缩、低温干燥即得0.97g兰香草酮，含量98.1%。

 

实施例3：兰香草酮的制备