[发明专利]一种天然重组纳米脂质载体制备技术与应用

权利要求书

1.一种天然重组脂蛋白纳米粒，其特征在于，它主要是由如下组分所制成：当固体质量为mg时，液体质量以ml计，载脂蛋白8-10份、脂质1-3份和药物1-1.5份。

2.根据权利要求1中所述的天然重组脂蛋白纳米粒，其特征在于，所述载脂蛋白为内源提取混合物，且主要包括ApoA-I、A-II、E、C和B-100等。

3.根据权利要求1-2所述的天然重组脂蛋白纳米粒，其特征在于，所述脂质为内源脱脂混合物，且主要包括胆固醇、胆固醇酯、甘油三酯和磷脂。

4.根据权利要求1-3所述的天然重组脂蛋白纳米粒，其特征在于，所载药物药学活性或药理活性分子选自紫杉烷类、喜树碱类、长春碱类、阿霉素类、环孢菌素类、黄酮类、二氢吡啶类、维A酸类、蒽醌类、挥发油类、鬼臼毒素类、嘌呤拮抗剂、嘧啶拮抗剂、叶酸拮抗剂、藤黄酸类、光敏剂类、治疗基因中的任一物质或其衍生物。

5.根据权利要求1-4所述的天然重组脂蛋白纳米粒，其特征在于，所述纳米粒粒径为20-210nm。

6.根据权利要求1-5所述的天然重组脂蛋白纳米粒，其特征在于，所述载脂蛋白和脂质的提取纯化方法如下：

(1)称取血浆组分IV沉淀初溶于磷酸盐缓冲液(pH5～6)，加入浓度为(5～25)％乙醇充分溶解，离心；

(2)取步骤(1)所得沉淀初溶于磷酸盐缓冲液(pH6～7)，加入浓度为(5～15)％乙醇充分溶解，离心；

(3)取上清液，稀盐酸调节pH至5～6，加入浓度为(10～30)％乙醇充分溶解，离心；

(4)取步骤(3)离心所得沉淀，用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液溶解后加无水乙醇脱脂；

(5)取步骤(4)离心所得沉淀，即所述载脂蛋白，上清液即所述脂质。

7.根据权利要求1-6所述的天然重组脂蛋白纳米粒制备工艺，其特征在于，主要包括如下步骤：

(1)称取所述载脂蛋白，磷酸盐缓冲液溶解得蛋白溶液；

(2)量取处方量的脂质成分，加入处方量药物，于磁力搅拌作用下将脂质逐滴滴加至上述蛋白溶液中，滴加结束后，继续磁力搅拌30～80min；

(3)磁力搅拌结束后，于34～40℃真空旋转蒸发除去乙醇，并于冰浴条件下超声，过0.22μm滤膜，冷冻干燥即得。

8.根据权利要求1-6所述的天然重组脂蛋白纳米粒制备工艺，其特征在于，主要包括如下步骤：

(1)称取所述载脂蛋白，磷酸盐缓冲液溶解得蛋白溶液；

(2)量取处方量的脂质成分，加入处方量药物，于37℃下旋转蒸发挥干有机溶剂，置于真空干燥器中过夜以除去残留溶剂；

(3)加入含有载脂蛋白的磷酸盐缓冲液，水合至形成混悬液，冰浴下探头超声20min，即得载药的纳米粒混悬液，过0.22μm滤膜，冷冻干燥即得。

9.根据权利要求1-5所述的天然重组脂蛋白纳米粒制备工艺，其特征在于，主要包括如下步骤：

(1)称取处方量血浆组分IV沉淀，加磷酸盐缓冲液，充分溶解后，离心，取上清液用乙醇溶解得脂质与载脂蛋白混悬液，继续离心；

(2)称取处方量药物置于上清液，于磁力搅拌作用下用注射器逐滴滴加混悬液(溶解药物)至水合介质溶液中，滴加结束后，继续磁力搅拌50～80min；

(3)磁力搅拌结束后，于37℃旋蒸除去乙醇，并于冰浴条件下探头超声，过0.22μm滤膜，冷冻干燥即得。

10.根据权利要求1-9所述的天然重组脂蛋白纳米粒，加生理盐水、或磷酸盐缓冲液、或5％葡萄糖溶液溶解，以静脉注射、或肌肉注射、或口服给药、或透皮给药方式，用于疾病的治疗。