[发明专利]同步检测草莓疫霉和树莓疫霉的三重PCR引物及其扩增方法和用途

说明书

技术领域           

本发明设计PCR技术检测寄生于莓类水果上草莓疫霉和树莓疫霉的三重PCR引物及其扩增方法和用途，属于莓类水果上草莓疫霉和树莓疫霉检测领域。

背景技术

草莓( Fragaria ananassa Duch) 属蔷薇科草莓属多年生缩根浆果类水果，果实柔软多汁，色泽艳丽，酸甜适口，营养丰富，富含多酚 黄酮类等抗氧化物质，能预防或减少心血管 肿瘤和贫血等疾病的发生，备受消费者青睐，被誉为水果皇后（陈卫平． 不同草莓品种果实品质的比较研究． 江西农业学报，2010，22 ( 9) : 46－48）。目前世界上大多数国家都有草莓栽培，世界各大洲中，亚洲草莓产量最多，主要分布在中国、土耳其、日本、韩国、伊朗、以色列等，并高度集中在中国。早在2003年我国草莓年生产量已达134万t，栽培面积7.6万hm2，分别占世界产量和面积的1/3和1/4，产量和面积均居世界第一位。草莓年生产量由多至少的国家依次是:中国、美国、西班牙、波兰、日本、意大利、韩国、墨西哥、俄罗斯、土耳其、德国等（王忠和. 草莓市场分析及其对策. 北方园艺, 北方园艺，2007，(7):110~111）。

草莓疫霉（P. fragariae）和树莓疫霉（P.rubi）是寄生于草莓的两种重要检疫性真菌。P. fragariae和P.rubi是草莓疫霉的两个变种，P. fragariae主要寄主为草莓，P.rubi主要寄主为树莓。P. fragariae和P. rubi均可侵染草莓，引起草莓红心病，使草莓植株枯萎和根部腐烂。1920在苏格兰的拉纳克郡地区首先发现并研究P. fragariae，随后在美国、澳大利亚、奥地利等报导，几乎遍布主要栽培草莓的地区。1937年首次在患有根腐病的树莓植株上分离得到P.rubi，随后在美国，英国、澳大利亚等地报道。草莓植株发生被侵染后幼根根尖开始腐烂，根上有长裂口时，中柱上面出现红色腐烂，由于腐烂发展，侧根很快地被破坏，引起主根呈现鼠尾状，中柱红色常常扩展到根颈。地上部症状取决于根部腐烂的严重程度，当条件有利于植物快速生长时，重病植株矮化，并在某些环境里，幼叶呈浅兰绿色、老叶是红色、橙色或黄色。少数严重感病植株生长比健株差，但叶子颜色没有变化，轻度感病植株的地上部分不易发现(Maas JL ,et al. Compendium of strawberry diseases.1998)。1971年加拿大新斯科舍生发生此病害，损失达当季栽培草莓总量的78%，每公顷经济损失达1500加币（Gourley  et al. Economic loss from strawberryred stele disease in Nova Scotia. Report, Research Station Kentville, Nova Scotia, Canada for 1971, 1972: 63-64）。