[发明专利]来自完全以母乳喂养的婴儿粪便的具有益生活性的菌株的分离、鉴定和表征

说明书

本申请是申请号为201080020442.2(国际申请号PCT/ES2010/000097)、申请日为2010年3月09日、发明名称为“来自完全以母乳喂养的婴儿粪便的具有益生活性的菌株的分离、鉴定和表征”的中国发明专利申请的分案申请，原申请为要求申请日为2009年3月10日、申请号为PCT/ES09/000130的西班牙申请的优先权的中国发明专利申请。

技术领域

本研究的一般目的是分离益生微生物以后续用于食品和制药工业，特别是将其用于幼儿配方奶中。所述微生物对pH、胆汁盐具有高度抗性并具有高度肠细胞粘附，因此它们特别适用于前述工业中。

背景技术

近几十年来，营养学已经得到了极大的发展，并且所述发展已改变了营养学的概念。以前认为膳食具有提供维持健康状况所必需的营养物的作用，而现在，这一概念已经发展为以下看法：膳食可以含有除了提供营养之外的促进健康的食品。这是食品工业开始开发大量促进健康的产品的原因。在这个领域，功能性食品的方面已有了极大的发展，其中人群对益生菌的食用每天都在增加。实际的挑战是扩大对这些食品的了解，在这些食品中含有益生菌的那些食品得到特别的关注。

存在非常古老的记录涉及来自食用具有高细菌含量的食品的有益效果，例如在旧约中，其中提及亚伯拉罕将其长寿的原因归结于食用奶，或者在公元前76年，罗马历史学家Plinius推荐使用发酵奶来治疗肠胃炎(Senmier和De Vrese，2001年)。

在上个世纪最初，俄国微生物学家Elie Metchnikoff(1845年-1916年)建议食用发酵奶调节肠微生物群，从而对人体健康产生积极作用(Metchnikoff，1908年)。他关注于下述事实：保加利亚百岁老人的人数令人难以置信，尽管这是最为贫穷的欧洲国家之一。他观察到保加利亚人大量食用酸奶。Metchnikoff成功地分离了产生酸奶的细菌，并将其用于他的研究中。这是益生研究的开始。Metchnikoff成为下述概念的坚定支持者：膳食可以保护人体免受病原侵入，并因此改善和延长生命的质量。他还是开发胶囊形式的乳酸菌制剂用于口服的第一人，该制剂称为乳杆菌素。

同时，法国微生物学家Tissier观察到，母乳喂养的新生儿的粪便微生物群比接受人造奶的儿童的粪便微生物群具有更多的双歧杆菌属的细菌，并且认识到这种微生物的有益作用。

之后在1940年，双歧奶显示在第一次世界大战期间减轻儿童的营养不良。1950年，Degusta厂制备了Biogur和Bio-garde。1989年，在瑞士，发酵奶的食用和产量提高。1993年，两位研究者Modler和Vila-García开发了第一种低酸度生物酸奶。

1965年，Lilly和Stillwell首次将术语“益生菌”用于命名胃发酵的产物。但是益生菌的更为有效和广泛使用的定义是在很长时间以后由Fuller说明的(Fuller，1992年；Fuller，1989年)。益生菌定义为：“经加入到食品中的活微生物的补充对接受者的健康起有益效果，因为它们调节他/她肠道微生物平衡的改善”。对于成年人，这包括来自发酵奶和用这些细菌冻干的制剂二者。

1998年，位于布鲁塞尔的国际生命科学会(International Life Science Institute，ILSI)将益生菌定义为活微生物，当其以足够量摄入时，对健康具有有益效果，该效果大于常规营养效果。它们有益地影响生物体的一个或多个功能。它们提供更好的健康状况，和/或降低疾病风险。它们可以对一般人群或其特殊群体具有功能。

目前存在益生微生物的定义的标准：

1.它们是人来源的。

2.它们具有非病原的性质。

3.它们对技术方法的破坏具有抗性。

4.它们对胃酸和胆汁的破坏具有抗性。

5.它们粘附于肠上皮。

6.它们能够在胃肠道定殖。

7.它们产生抗微生物物质。

8.它们调节免疫响应。

9.它们影响人代谢活性(胆固醇吸收、维生素产生等)

益生细菌可以影响所有的肠细胞和这些细胞的作用机制，包括对微生物群的作用(Backhed和Ley，2005年)、免疫功能的调节(Picard等人，2004年；Kalliomaki，2004年)和上皮屏障功能的提高(Madsen等人，2001年；Isolauri&Salminen，2005年)。