[发明专利]一种牡丹花托愈伤组织诱导及分化不定芽方法有效
| 申请号： | 201410478283.0 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104285787B | 公开（公告）日： | 2017-05-17 |
| 发明（设计）人： | 贾文庆;陈韵;穆金艳;刘会超;王艳丽;林紫玉;王少平 | 申请（专利权）人： | 河南科技学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 453003 河南省新乡*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 牡丹 花托 组织 诱导 分化 不定 方法 | ||
1.一种牡丹花托愈伤组织诱导及分化不定芽方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)花托外植体的选取与消毒：选取直径为0.5～0.6cm的花蕾，4℃冰箱预处理5～6d后，常规消毒，剥取无菌花托，花托直径为0.3～0.5cm；
2)初始培养：将直径为0.3～0.5cm的无菌花托在启动培养基上暗培养一周，然后转至弱光下培养30～50d，产生初始愈伤组织；弱光下的培养条件为：培养温度25±1℃，光照14h/d，弱光光照强度800～1000Lx；所述启动培养基为MS+2，4-D0.5～1.0mg/L+KT2.0～2.5mg/L+谷氨酰胺0.5g/L+丝氨酸0.1g/L；
3)增殖培养：将初始培养获得的愈伤组织，转接到增殖培养基中进行增殖培养；培养条件为：培养温度25±1℃，光照14h/d，光照强度1500Lx；所述增殖培养基为MS+2，4-D0.5～1.0mg/L+KT1.5～2.0mg/L+NAA1.5～2.0mg/L+谷氨酰胺0.5g/L+丝氨酸0.1g/L；
4)不定芽分化培养：将初始培养或增殖培养获得的愈伤组织，转接到不定芽分化培养基上弱光环境培养4d，然后置于正常环境下培养；所述不定芽分化培养基为MS+ZT2.0～3.0mg/L+6-BA10.0～15.0mg/L+水解乳蛋白10.0mg/L；所述弱光环境培养条件为：培养温度15±1℃，光照14h/d，弱光光照强度500～600Lx；所述正常环境培养条件为：培养温度20±1℃，光照14h/d，光照强度2000Lx。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述花托直径为0.3～0.5cm；所述步骤1)中，所述花蕾4℃冰箱预处理5～6d；所述步骤2)中，所述启动培养基为MS+2，4-D0.8mg/L+KT2.3mg/L+谷氨酰胺0.5g/L+丝氨酸0.1g/L；所述初始愈伤组织培养环境为弱光：光照强度800～1000Lx。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中，所述增殖培养基为MS+2，4-D0.8mg/L+KT1.5mg/L+NAA2.0mg/L+谷氨酰胺0.5g/L+丝氨酸0.1g/L；所述步骤4)中，所述不定芽分化培养基为MS+ZT2.5mg/L+6-BA12.0mg/L+水解乳蛋白10.0mg/L。
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