[发明专利]一种左西孟旦潜在基因毒性杂质及其制备、检测方法

权利要求书

1.一种左西孟旦潜在基因毒性杂质，其具有式Ⅰ所述结构：

。

2.如权利要求1所述的杂质，其为式Ⅰ化合物药学上可接受的盐、溶剂合物、对应异构体或非对映异构体。

3.如权利要求1所述的杂质，其具有如下核磁数据：H-NMR（d₆-DMSO，400MHz）：δ =12.78 (s, 1H, NH), 11.02 (s, 1H, NH), 10.92(s, 1H, NH), 7.84 (m, 4H, Ar), 7.61 (d, 2H, Ar)， 7.40 (d, 2H, Ar), 3.39 (m, 2H, CH₂), 2.72 (m, 2H, CH₂), 2.25 (m, 2H, CH), 1.10 (d, 6H, 2CH₃) ppm；其中各峰位移±0.1 ppm。

4.一种制备权利要求1所述杂质的方法，包括一定温度下，6-(4-氨基苯基)-4,5-二氢-5-甲基-3(2H)-哒嗪酮（式Ⅳ）与亚硝酸在溶剂中进行反应：

。

5.如权利要求4所述的制备方法，包括将式Ⅳ化合物和/或其盐、游离胺、溶剂化物在亚硝酸作用下，于溶剂中反应；所述的亚硝酸为亚硝酸盐与酸原位反应制备或亚硝酸溶液。

6.如权利要求4或5所述的制备方法，所述溶剂为水、卤代烃类溶剂、醇类溶剂、酯类溶剂、芳烃类溶剂、酮类溶剂、醚类溶剂、腈类溶剂、酰胺类溶剂或有机酸、无机酸及其溶液的任一种或其组合；所述的有机酸及其溶液优选醋酸；所述的无机酸及其溶液优选为盐酸、氢溴酸、硫酸。

7.一种用于检测左西孟旦样品中潜在的基因毒性杂质的参比试剂，所述试剂包括权利要1所述式Ⅰ化合物和/或其药学上可接受的盐、溶剂合物；优选所述参比试剂还包括分析上可接受的载体。

8.如权利要求1所述杂质用于检测左西孟旦原料药及其制剂中潜在基因毒性杂质的应用；所述制剂优选为口服剂或注射剂。

9.一种权利要求1所述杂质的检测方法，包括采用高效液相色谱法测定左西孟旦中该基因毒性杂质的含量；所述高效液相色谱法为反相色谱法；优选色谱柱为C8、C18、苯基键合硅胶为填料的分析色谱柱；检测器为紫外检测器；以甲醇和磷酸盐缓冲液为流动相，按照等度和梯度洗脱程序进行检测；优选所述的磷酸盐缓冲溶液的pH值控制在1~4范围内。

10.如权利要求9所述的方法，所述色谱柱为Agilent XDB-C18柱；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；检测波长为380nm；流动相为甲醇：磷酸盐缓冲液（体积比）=6:4。