[发明专利]一种坤灵丸的气相指纹图谱的分析方法及其应用

权利要求书

1.一种坤灵丸气相色谱标准对照指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)供试品溶液制备：

取坤灵丸，加水，超声提取，提取液加乙酸乙酯萃取，萃取液取乙酸乙酯层，加乙酸乙酯定容至刻度，摇匀，过微孔滤膜，即得；

2)获得气相色谱图：

将供试品溶液进气相色谱仪，得到气相色谱图；

3)生成对照指纹图谱

选择合格的多批坤灵丸样品的气相指纹图谱中确定共有峰，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，确定坤灵丸对照指纹图谱，根据需要可以加入有效成分的标准对照品以作为参照物峰，

其中气相色谱的色谱条件如下：

色谱柱：固定相以14％氰丙基-苯基86％二甲基聚硅氧烷为填料，柱温：程序升温条件见下表；进样口温度：150～200℃；检测器：FID；温度：230～280℃；载气：氮气；分流进样；分流比：1∶1～5∶1；进样量：0.5～1μl；

程序升温表

2.根据权利要求1所述的气相色谱标准对照指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)供试品溶液的制备，方法如下：

取坤灵丸适量，研成细粉，糖衣丸除去糖衣，精密称取0.8～1.2g，加水20～30mL，超声处理20～40min，加乙酸乙酯萃取2次，第1次10～20ml，第2次5～15ml，合并萃取液至15～35ml容量瓶中，加乙酸乙酯定容至刻度，摇匀，过0.2-0.3μm微孔滤膜，即得；

2)获得气相色谱图：

以丹皮酚作为参照物制备标准对照品溶液，方法为：取丹皮酚对照品适量，加乙酸乙酯制成每1mL含10～15μg的溶液，作为对照品溶液；

将供试品溶液和对照品溶液注入气相色谱仪，得到色谱图，其中色谱条件为：色谱柱固定相以14％氰丙基-苯基86％二甲基聚硅氧烷为填料；柱温：见程序升温条件表；进样口温度：180℃；检测器：FID；温度：250℃；载气：氮气；分流进样；分流比：1∶1；进样量：1μL；

3)生成对照指纹图谱

对十批以上坤灵丸的气相指纹图谱进行分析比较，确定10个共有峰，色谱图中，以与丹皮酚对照品峰保留时间相同的色谱峰为参照，计算其它9个共有峰的相对保留时间分别为：0.365、0.372、0.769、0.772、1.000、1.263、1.283、1.359、1.395、1.565，其相对偏差均为±3％，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统，拟合确定得到坤灵丸标准对照气相指纹图谱。

3.根据权利要求1所述的气相色谱标准对照指纹图谱的建立方法，其特征在于，1)供试品溶液的制备方法如下：

取坤灵丸适量，糖衣丸除去糖衣，研成细粉，精密称取1.0g，加水25mL，超声处理30min，加乙酸乙酯萃取2次，第一次15ml，第二次10ml，合并萃取液至25ml容量瓶中，加乙酸乙酯定容至刻度，摇匀，过0.22μm微孔滤膜，即得。

4.根据权利要求2所述的气相色谱标准对照指纹图谱的建立方法，其特征在于，2)丹皮酚对照品溶液的制备方法为：取丹皮酚对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1mL含对丹皮酚约12.55μg的溶液，即得。

5.根据权利要求1所述的气相色谱标准对照指纹图谱的建立方法，其特征在于，其中程序升温表为：