[发明专利]基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法

权利要求书

1.一种基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法，其特征在于，按以下步骤依次进行：

(1)对石英纤维进行丙酮洗、苯洗、碱洗、酸洗、高温活化，然后用具有不饱和双键的硅烷化试剂进行硅烷化处理；

(2)在聚合溶剂中加入功能单体、交联剂及引发剂，混合，取一定量该溶液于试管中，插入硅烷化处理后的石英纤维，通入氮气除去氧，密封试管口，然后进行热引发共聚反应；聚合一定时间，取出石英纤维，氮气吹干，密封保存，放在烘箱中于一定温度下老化一定时间；

(3)将制备得到的石英纤维涂层，用具有巯基的硅烷化试剂进行硅烷化处理，硅烷化反应一段时间，取出石英纤维涂层，乙醇洗净，然后氮气吹干保存；

(4)经过巯基修饰的多孔聚合物涂层石英纤维与制备得到的纳米金溶液进行键合，在冰箱中键合一定时间后，用超纯水冲洗干净，氮气吹干保存；

(5)将第(4)步中最后得到的纳米金/多孔聚合物涂层石英纤维，插入到核酸适配体PBS缓冲溶液的中，室温反应一定时间，取出后用PBS缓冲液清洗，氮气吹干保存。

2.如权利要求1所述基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法，其特征在于：纳米金与巯基修饰的多孔聚合物涂层通过S-Au键将纳米金化学键合在石英纤维涂层表面，再通过纳米金与巯基修饰的核酸适配体化学键合反应将核酸适配体固载于纳米金涂层表面。

3.如权利要求1所述基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法，其特征在于：所述的具有不饱和双键的硅烷化试剂为3-甲基丙烯酰基-丙基-三甲氧基硅烷，具有巯基的硅烷化试剂为3-巯丙基三甲氧基硅烷，硅烷化时间都为1小时。

4.如权利要求1所述基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法，其特征在于：所述的纳米金键合条件为，经过巯基修饰的多孔聚合物涂层石英纤维与制备得到的100μL纳米金溶液在内插管中进行键合，在冰箱中4℃进行，键合时间为36小时。

5.如权利要求1所述基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法，其特征在于：所述的核酸适配体键合条件为，纳米金/多孔聚合物涂层石英纤维插入120μL的浓度为4.17μg/mL的核酸适配体PBS缓冲溶液中，缓冲溶液为10mM PBS，室温下键合，键合时间为24小时，其中，所述缓冲溶液为135mM NaCl与10mM NaH₂PO₄/Na₂HPO₄的混合液，其PH为7.4。