[发明专利]基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于化学分析测试仪器领域，涉及到一种基于核酸适配体/纳米金/多孔聚合物涂层新型固相微萃取纤维的制备方法。适用于生物、医药、环境样品和食品等复杂基体中痕量生物碱、抗生素或核苷酸类物质的高选择性、快速分离与富集。

背景技术

样品前处理是样品分析的第一步，也是整个样品分析过程中的关键步骤，直接影响分析的准确度和精密度，其主要目的在于分离和富集样品中的待测组分。而传统样品前处理技术如液液萃取、溶剂提取、索氏提取、柱色谱等，普遍存在耗时、低效、有毒有机溶剂用量大或操作较繁琐等问题，导致样品前处理成为整个分析过程中最费时费力的环节，占样品分析时间的60％-70％，同时分析过程中产生的误差至少三分之一来自于样品前处理。急需发展快速、高效、简单、绿色的样品前处理技术。

固相微萃取技术(SPME)由Arther和Pawliszyn于1990年提出，其集采样、萃取、浓缩及进样操作于一体，弥补了传统样品前处理方法的不足，具有耗时少、效率高、操作简单等优点，是一种无溶剂或少溶剂的样品前处理技术，易与气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、毛细管电泳(CE)等多种仪器联用。涂层是SPME技术发展的关键，涂层的性质很大程度上决定了方法的灵敏度和选择性，但目前商品化涂层种类有限，大部分商品化涂层是通过物理作用吸附到萃取头表面，选择性不高，稳定性较差，在有机溶剂里不稳定，且不适合于处理极性或碱性物质，限制了其应用的范围。为扩展SPME技术的应用范围，国内外众多研究小组研制了各种新型的SPME涂层材料，如离子液体(Liu J.F.,Li N.,Jiang G.B.,Liu J.M.,J.A.,Wen M.J.2004.J.Chromatogr.A1066:27-32)、单壁碳纳米管(Li Q.L.,Wang X.F.,Yuan D.X.2009.J.Chromatogr.A1216:1305-1311)、冠醚(Zeng,Z.R.,W.L.Qiu,and Z.F.Huang.2001.Anal.Chem.73:2429-2436)、杯芳烃(Li,X.J.,Z.R.Zeng,S.Z.Gao,and H.B.Li.2004.J.Chromatogr.A1023:15-25)等，这些涂层的选择性相对于商品化涂层有一定提高，但分析对象范围较窄，且选择性仍不够强。自1990年以来，分子印迹技术由于类似于酶-底物的“钥匙-锁”相互作用识别原理在分析化学领域，尤其是在固相萃取、色谱填料、化学传感器等方向获得了广泛应用。该技术制备的分子印迹聚合物(MIP)具有选择性高、化学稳定性好、制备简单等特点，特别适合作为SPME的选择性涂层材料。但由于分子印迹技术本身的局限，尚存在以下不足之处：MIP合成需加入大量模板分子，如果洗脱不干净在萃取时易导致模板分子渗漏，干扰测定；MIP选择性主要基于氢键作用，在极性溶剂如水中萃取时受干扰严重，而生物样品常以水溶液形式存在，因此MIP涂层在生物样品分析中的应用受到限制；MIP涂层萃取时常采用苯、甲苯、氯仿或其它有机溶剂，污染环境；MIP涂层的刚性识别“空穴”在制备过程中或萃取时容易被破坏或变形，其特异性及亲合力不如生物识别体系如酶-底物、抗体-受体等相互作用。因此，研制选择性更强、更适合于复杂生物样品中痕量物质分析的SPME涂层材料非常必要，而特异性强、亲和力高等优点的生物识别体系无疑是更为合适的选择。