[发明专利]一种紫花地丁药材中七叶亭含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及药材含量的测定方法技术领域，尤其涉及一种紫花地丁药材中七叶亭含量的测定方法。 

背景技术

紫花地丁为堇菜科植物紫花地丁Viola yedoensis Makino的干燥全草，又名地丁草、独行虎、紫地丁，为常用中药 (中国药典委员会.中华人民共和国药典，2010版一部.北京：中国医药科技出版社，2010.1)，其性寒，味微苦，具有清热解毒、凉血消肿等功效，用于治疗痈肿疔疮、乳痈肠痈、丹毒肿痛、毒蛇咬伤等症状。现代药理学研究表明，紫花地丁具有抗炎、抑菌、抗HIV病毒和调节免疫等作用。紫花地丁是众生胶囊处方中的一味，为了控制原料药的质量，保证成品符合质量标准，国家食品药品监督管理局国家药品标准YBZ295122005-2009Z规定每粒众生胶囊中七叶亭含量不得低于0.6mg，然而，目前缺乏紫花地丁中七叶亭的含量测定方法。因此，以上所述问题亟待解决。 

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，而提供一种准确度高、精密度高的紫花地丁药材中七叶亭含量的测定方法。 

本发明是通过以下技术方案来实现的。 

一种紫花地丁药材中七叶亭含量的测定方法，它是按照以下步骤进行测定的： 

(1)对照品溶液的制备

精密称取干燥至恒重的七叶亭对照品适量，加流动相溶解，制成每1ml含七叶亭25.00-26.00μg的溶液，即制得对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备

精密称取紫花地丁药材粉末适量作为供试品，加入甲醇溶液适量，超声处理使溶解，放冷至室温，过滤制得续滤液，精密吸取续滤液适量，精密加入流动相溶解，即制得供试品溶液；

 (3)采用高效液相色谱法测定

用具有紫外检测器的高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇、冰醋酸与水的混合液为流动相进行洗脱；检测波长为353nm；分别精密吸取所述对照品溶液与所述供试品溶液，注入液相色谱仪，进行测定，最后计算出供试品中七叶亭含量。

其中，步骤(1)对照品溶液的制备具体为：精密称取干燥至恒重的七叶亭对照品12.50-13.00mg，加流动相溶解，制成每1ml含七叶亭25.00-26.00μg的溶液，即制得对照品溶液。 

其中，步骤(2)供试品溶液的制备具体为：取紫花地丁药材粉碎，过4号筛，精密称取过筛的紫花地丁药材粉末1-1.5g，置于100ml量瓶中，加甲醇溶液50ml，超声处理30min使溶解，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，过滤制得续滤液，精密吸取续滤液5ml至25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，即制得供试品溶液。 

其中，所述微孔滤膜的孔径为0.45μm。 

其中，步骤(3)采用高效液相色谱法测定中，流动相为甲醇、冰醋酸与水按照20：80：0.4的比例混合而成的混合液。 

其中，步骤(3)采用高效液相色谱法测定具体为：用具有紫外检测器的高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇、冰醋酸与水的混合液为流动相进行洗脱；检测波长为353nm；柱温为室温；流速为1.00mL/min；进样量为10μL；分别精密吸取所述对照品溶液与所述供试品溶液，注入液相色谱仪，进行测定，最后计算出供试品中七叶亭的含量。 

其中，所述步骤(3)采用高效液相色谱法测定中，最后采用外标法计算出供试品中七叶亭的含量，计算公式如下： 

w= 

式中，C为对照品溶液中七叶亭的浓度，C_样中为供试品溶液中七叶亭的浓度，单位为μg/ml；

A为对照品溶液中七叶亭的峰面积，A_样中为供试品溶液中七叶亭的峰面积；

w为供试品中七叶亭的含量，单位为mg/g。

上述的紫花地丁药材中七叶亭含量的测定方法测定的七叶亭的含量≥7.0mg/g。 

本发明的有益效果为：本发明的紫花地丁药材中七叶亭含量的测定方法测定的七叶亭的含量=8.6 mg/g≥7.0mg/g，符合控制紫花地丁含量的使用要求； 

本发明的紫花地丁药材中七叶亭含量的测定方法平均回收率为98.4%，回收率RSD=0.6%＜5.0%，方法学验证的回收率高，因此本测定方法的准确度高；