[发明专利]由自体血浆构建的组织工程神经修复材料及其制备方法

权利要求书

1.一种由自体血浆构建的组织工程神经修复材料，其特征在于：包括载体和种子细胞，所述载体由含有纤维蛋白原和细胞生长因子的自体血浆与凝聚物构建而成，所述种子细胞为自体骨髓间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述的由自体血浆构建的组织工程神经修复材料，其特征在于：所述含有纤维蛋白原的血浆和凝聚物以体积比1:1～3:7混合。

3.根据权利要求1或2所述的由自体血浆构建的组织工程神经修复材料，其特征在于：所述凝聚物为钙离子溶液或者氯化钙-凝血酶混合溶液中的一种。

4.根据权利要求3所述的由自体血浆构建的组织工程神经修复材料，其特征在于：所述钙离子浓度为10～50mmol/L；所述凝血酶浓度为0～2U/ml。

5.一种制备权利要求1所述的由自体血浆构建的组织工程神经修复材料的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）种子细胞的准备：用含抗凝剂的采血管获取自体静脉血，3000rpm离心5-10min，提取上层清液，得到含有纤维蛋白原与细胞生长因子的血浆；

（2）血浆的制备：获取自体静脉血，静置到分层，提取上层清液，得到含有纤维蛋白原与细胞生长因子的血浆；

（3）氯化钙-凝血酶混合溶液的制备：（3a）配制浓度为10～50mmol/L的钙离子溶液；（3b）取步骤（3a）中的钙离子溶液稀释凝血酶至0～1U/ml，得到氯化钙-凝血酶溶液；

（4）将步骤（3）所获得的氯化钙-凝血酶混合液加入步骤（2）所获得的血浆中，混合均匀，得到纤维蛋白/凝聚物载体；

（5）取步骤（1）所获得的骨髓间充质干细胞加入步骤（4）所获得的纤维蛋白/凝聚物载体中，得到骨髓间充质干细胞/纤维蛋白-凝聚物神经修复材料。

6.根据权利要求5所述的由自体血浆构建的组织工程神经修复材料的制备方法，其特征在于：

所述步骤（1）中种子细胞的准备：用差速培养法体外培养自体骨髓细胞，通过完全培养基培养增殖；

根据权利要求5或6所述的由自体血浆构建的组织工程神经修复材料的制备方法，其特征在于：

所述步骤（3）中氯化钙-凝血酶混合溶液的制备：步骤（3a）取浓度为450mmol/L的医用氯化钙用PBS稀释液稀释配制浓度为10～50mmol/L的钙离子溶液。