[发明专利]一种用酶法使大豆油中生成维生素A的方法

权利要求书

1.一种用酶法使大豆油中生成维生素A的方法，其特征在于用大豆油中生成维生素A的方法步骤如下：

步骤一：β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶的提取，首先选用60日龄三黄鸡，屠宰前一天，禁食12h，自由饮水，取空肠，用冰冷的生理盐水冲洗干净，用剪刀剖开肠道，取盖玻片轻轻挂下肠粘膜，将肠粘膜按1:5（W/V）的比例如加入pH7.4的PBS缓冲液，于0℃匀浆，1000r/min低温离心30min，取上清，将酶液保存在-70℃下备用；

步骤二：β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶催化大豆三级油生成VA：取大豆三级油100g，加入一定量的β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶，60 r/min机械搅拌，在温度40℃下加入脱氧胆酸钠，Tween 40，水浴反应一段时间，3500r/min离心20min，取上清样测定油中VA含量。

2.根据权利要求1所述的一种酶法使大豆油中生成维生素A的方法，其特征在于步骤二中油相中β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶添加量为0.5%~3%，在此条件下进行大豆油生成VA其它步骤与具体实施方式一相同。

3.根据权利要求1所述的一种酶法使大豆油中生成维生素A的方法，其特征在于步骤二中油相中β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶添加量为0.5%~3%，反应温度为30℃~50℃，在此条件下进行大豆油生成VA其它步骤与具体实施方式一相同。

4.根据权利要求1所述的一种酶法使大豆油中生成维生素A的方法，其特征在于步骤二中油相中β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶添加量为0.5%~3%，反应温度为30℃~50℃，反应时间为4h~7h，在此条件下进行大豆油生成VA其它步骤与具体实施方式一相同。

5.根据权利要求1所述的一种酶法使大豆油中生成维生素A的方法，其特征在于步骤二中油相中β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶添加量为0.5%~3%，反应温度为30℃~50℃，反应时间为4h~7h，脱氧胆酸钠添加量为0.01%~0.05%，在此条件下进行大豆油生成VA其它步骤与具体实施方式一相同。

6.根据权利要求1所述的一种酶法使大豆油中生成维生素A的方法，其特征在于步骤二中油相中β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶添加量为0.5%~3%，反应温度为30℃~50℃，反应时间为4h~7h，脱氧胆酸钠添加量为0.01%~0.05%，Tween 40添加量为0.01%~0.05%，在此条件下进行大豆油生成VA其它步骤与具体实施方式一相同。

7.根据权利要求1所述的一种酶法使大豆油中生成维生素A的方法，其特征在于步骤二中将由单因素确定的结果再进一步优化得到条件，结果为β -胡萝卜素-15，15′-加氧酶添加量为0.5%~3%，反应温度为30℃~50℃，反应时间为4h~7h，脱氧胆酸钠添加量为0.01%~0.05%，Tween 40添加量为0.01%~0.05%，用优化结果进行大豆三级油中VA生成。