[发明专利]一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条，其特征在于，所述试纸条含有衬板（1）和依次排列在衬板（1）上的样品垫（2）、金标结合垫（3）、纤维素膜（4）和吸水垫（7），所述金标结合垫（3）内吸附有异氯硫磷金标抗体，所述纤维素膜（4）上有隐形检测线（5）和隐形对照线（6），所述隐形检测线（5）用异氯硫磷半抗原偶联的载体蛋白溶液印制，所述隐形对照线（6）用兔抗鼠IgG抗体印制。

2.根据权利要求1所述的一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条，其特征在于，所述异氯硫磷金标抗体为胶体金标记的异氯硫磷单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条，其特征在于，所述的偶联异氯硫磷半抗原的载体蛋白为牛血清白蛋白BSA、鸡卵清白蛋白OVA或人血清白蛋白HAS中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条，其特征在于，在试纸条的吸水垫上设有手柄端保护膜，在样品垫上设有样品浸入端保护膜。

5.根据权利要求1所述的一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条，其特征在于，所述的样品垫用玻璃纤维棉、尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜中的一种或几种制成。

6.根据权利要求1所述的一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条，其特征在于，所述的纤维素膜为硝酸纤维素膜、纯纤维素膜或羧化纤维素膜中的一种或几种。

7.权利要求1所述的一种异氯硫磷胶体金快速检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）异氯硫磷半抗原的合成；

2）异氯硫磷半抗原与载体蛋白偶联得到异氯硫磷半抗原偶联的载体蛋白溶液；

3）异氯硫磷金标抗体的制备；

4）金标结合垫的制备；

5）兔抗鼠IgG抗体的制备；

6）异氯硫磷半抗原偶联的载体蛋白溶液和兔抗鼠IgG抗体包被纤维素膜；

7）试纸条的组装。

8.根据权利要求7所述的异氯硫磷金快速检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中异氯硫磷半抗原的合成步骤如下：

81）O-甲基-O-（2-氯-4-硝基苯基）硫代磷酰氯的合成：称取2-氯-4-硝基苯酚3.7 g用乙腈溶解；常温下，将溶液逐滴加入20 mL乙腈溶解的O-甲基硫代磷酰氯3.83 g、粉状K₂CO₃ 8.7 g混合溶液，滴完后，继续反应1 小时，反应完毕后真空过滤，蒸去溶剂，得黄色油状物，柱层析，用体积比8：1的石油醚∕二氯甲烷洗涤，蒸去溶剂得淡黄色油状液体5.9 g；

82）异氯硫磷半抗原：O-甲基-O-（2-氯-4-硝基苯基）-N- (丁酸)硫代磷酸酯的合成：称取4-氨基丁酸0.54 g、KOH 0.78 g，溶解于6 mL甲醇中，冰水浴冷却至0-10 ℃，搅拌下缓慢加入溶解于6 mL甲醇溶液的步骤（81）得到的黄色油状液体1.28 g，保温反应2 小时，反应完毕后，用体积比7：1的石油醚∕乙醚洗涤，水层调pH = 3. 0后用乙醚提取，无水硫酸钠干燥，蒸去溶剂，得浅黄色油状物O-甲基-O-（2-氯-4-硝基苯基）-N-（丁酸）硫代磷酸酯1.23g。