[发明专利]一种富集纯化血小板的方法

权利要求书

1.一种富集纯化血小板的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

(1)全血中加入抗凝剂，以1000rpm离心10分钟，离心结束后，吸取红细胞层以上部分，得到富集物A；剩余红细胞层中加入生理盐水，再以1000rpm离心10分钟，取红细胞层以上部分，得到富集物B，富集物B与富集物A混合，得到富集物C；

(2)向富集物C中加入红细胞裂解液，混匀后静置半小时后以1500rpm离心20分钟，分别收集上清液A与中间白色絮状层A，上清液A以1500rpm离心10分钟，收集其底部白色层B，与中间白色絮状层A混合，再加入生理盐水，以1500rpm离心10分钟，弃上清液B，收集中间白色层C，收集时避免底部红色残留，收集物即为浓缩富集的血小板。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述抗凝剂为枸橼酸钠、肝素或水蛭素。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中，所述红细胞裂解液为氯化铵水溶液或淋巴细胞分离液。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中，所述氯化铵水溶液与富集物C的体积比是1:2，所述氯化铵水溶液的质量浓度为1.0％。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中，所用的淋巴细胞分离液购自上海索莱宝生物科技有限公司，淋巴细胞分离液与富集物C的体积比是1:1。

6.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述抗凝剂与全血的体积比为1：9。

7.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述枸橼酸钠质量浓度为3.2％～3.8％。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中，收集其底部白色层B，与中间白色层A混合，再加入生理盐水，所述生理盐水的加入量为全血体积的0.2～1倍。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，剩余红细胞层中加入生理盐水，所述生理盐水的加入量为全血体积的0.2～1倍。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法按以下步骤进行：

(1)全血中加入抗凝剂，抗凝剂与全血的体积比为1：9，以1000rpm离心10分钟，离心结束后，吸取红细胞层以上部分，得到富集物A；剩余红细胞层中加入生理盐水，再以1000rpm离心10分钟，取红细胞层以上部分，得到富集物B，富集物B与富集物A混合，得到富集物C；

(2)向富集物C中加入氯化铵水溶液，所述氯化铵水溶液与富集物C的体积比是1:2，所述氯化铵水溶液的质量浓度为1.0％，混匀后静置半小时后以1500rpm离心20分钟，分别收集上清液A与中间白色絮状层A，上清液A以1500rpm离心10分钟，收集其底部白色层B，与中间白色絮状层A混合，再加入生理盐水，以1500rpm离心10分钟，弃上清液B，收集中间白色层C，收集时避免底部红色残留，收集物即为浓缩富集的血小板。