[发明专利]植物耐低温基因AtLCBK1的应用有效
申请号: | 201410510483.X | 申请日: | 2014-09-28 |
公开(公告)号: | CN104357465B | 公开(公告)日: | 2017-01-18 |
发明(设计)人: | 杨淑华;张瑶;张晓燕 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 低温 基因 atlcbk1 应用 | ||
1.植物耐低温基因AtLCBK1的应用,其特征在于,通过在植物中过表达AtLCBK1基因,获得耐低温的转基因植物;
其中,AtLCBK1基因的序列为:
i)Seq ID No.1所示的核苷酸序列;或
ii)Seq ID No.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列;或
iii)在严格条件下与Seq ID No.1所示序列杂交的核苷酸序列;
所述严格条件为在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下杂交,并用该溶液洗膜。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述植物包括单子叶植物和双子叶植物。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述植物包括但不限于拟南芥。
4.一种构建耐低温的转基因拟南芥的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取拟南芥总RNA,反转录获得cDNA,以cDNA为模板,F和R为引物,扩增AtLCBK1基因,将扩增产物构建到表达载体pSuper1300上,获得的重组表达载体命名为AtLCBK1-pSuper1300;
2)用AtLCBK1-pSuper1300转化农杆菌GV3101,然后利用转化的农杆菌侵染拟南芥花序,获得耐低温的转基因拟南芥幼苗;
其中,步骤1)中所述引物F和R的核苷酸序列如Seq ID No.3和4所示。
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