[发明专利]植物耐低温基因AtLCBK1的应用有效

专利信息
申请号: 201410510483.X 申请日: 2014-09-28
公开(公告)号: CN104357465B 公开(公告)日: 2017-01-18
发明(设计)人: 杨淑华;张瑶;张晓燕 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54;C12N15/82;A01H5/00
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司11002 代理人: 王文君
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 植物 低温 基因 atlcbk1 应用
【权利要求书】:

1.植物耐低温基因AtLCBK1的应用,其特征在于,通过在植物中过表达AtLCBK1基因,获得耐低温的转基因植物;

其中,AtLCBK1基因的序列为:

i)Seq ID No.1所示的核苷酸序列;或

ii)Seq ID No.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列;或

iii)在严格条件下与Seq ID No.1所示序列杂交的核苷酸序列;

所述严格条件为在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下杂交,并用该溶液洗膜。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述植物包括单子叶植物和双子叶植物。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述植物包括但不限于拟南芥。

4.一种构建耐低温的转基因拟南芥的方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)提取拟南芥总RNA,反转录获得cDNA,以cDNA为模板,F和R为引物,扩增AtLCBK1基因,将扩增产物构建到表达载体pSuper1300上,获得的重组表达载体命名为AtLCBK1-pSuper1300;

2)用AtLCBK1-pSuper1300转化农杆菌GV3101,然后利用转化的农杆菌侵染拟南芥花序,获得耐低温的转基因拟南芥幼苗;

其中,步骤1)中所述引物F和R的核苷酸序列如Seq ID No.3和4所示。

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