[发明专利]一种乙型肝炎病毒耐药性和基因型的检测试剂盒与检测方法有效
申请号: | 201410514984.5 | 申请日: | 2014-09-29 |
公开(公告)号: | CN105441584B | 公开(公告)日: | 2019-02-05 |
发明(设计)人: | 孙兰华;刘莹莹;张冠斌;项光新;邢婉丽 | 申请(专利权)人: | 北京博奥晶典生物技术有限公司;清华大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6858;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;陈晓庆 |
地址: | 101111 北京市北京经济*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乙型肝炎 病毒 耐药性 基因型 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于检测乙型肝炎病毒的7种突变型和3种基因型的试剂盒,该试剂盒包括如下三组引物:
(1)用于检测乙型肝炎病毒6种突变型的第一组引物,包括:
所述乙型肝炎病毒6种突变型为180M型、181T型、181V型、204I-ATC型、204V型和236T型;
a、用于检测180M型的引物为:SEQ ID NO.4所示的正向引物和用于与正向引物配对的SEQ ID NO.9所示的引物;
b、用于检测181T型的引物为: SEQ ID NO.5所示的和SEQ ID NO.8中第22-42位核苷酸分子所示的正向引物,与正向引物配对的SEQ ID NO.9所示的引物;
c、用于检测181V型的引物为:SEQ ID NO.3所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.9所示的引物;
d、用于检测204I-ATC型的引物为:SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.6所示的正向引物,与正向引物配对的SEQ ID NO.9所示的引物;
e、用于检测204V型的引物为:SEQ ID NO.2所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.9所示的引物;
f、用于检测236T型的引物为:SEQ ID NO.7所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.9所示的引物;
(2)用于检测乙型肝炎病毒的3种基因型的第二组引物,包括:
所述乙型肝炎病毒的3种基因型为HBV/B型、HBV/C型和HBV/D型;
g、用于检测HBV/B型的引物为:SEQ ID NO.13所示的正向引物,与正向引物配对的SEQID NO.17所示的和SEQ ID NO.18所示的引物;
h、用于检测HBV/C型的引物为:SEQ ID NO.15所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.19所示的引物;
i、用于检测HBV/D型的引物为:SEQ ID NO.16所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.20所示的引物;
(3)用于检测乙型肝炎病毒的1896A型和204I-ATT型的第三组引物,包括:
j、用于检测1896A型的引物为:SEQ ID NO.22所示的正向引物,与正向引物配对的SEQID NO.24所示的、SEQ ID NO.25所示的和SEQ ID NO.26所示的引物;
k、用于检测204I-ATT型的引物为:SEQ ID NO.21所示的正向引物和与正向引物配对的SEQ ID NO.27所示的引物;
所述试剂盒还包括连接有探针的基因芯片,所述探针与标签序列一一对应和特异结合;
所述探针的序列如下:
(1)用于检测1896A型的探针的序列如SEQ ID NO.28所示;
(2)用于检测204I型的探针的序列如SEQ ID NO.29所示;
(3)用于检测180M型的探针的序列如SEQ ID NO.31所示;
(4)用于检测236T型的探针的序列如SEQ ID NO.32所示;
(5)用于检测181T型的探针的序列如SEQ ID NO.33所示;
(6)用于检测181V型的探针的序列如SEQ ID NO.34所示;
(7)用于检测204V型的探针的序列如SEQ ID NO.36所示;
(8)用于检测B型的探针的序列如SEQ ID NO.30所示;
(9)用于检测C型的探针的序列如SEQ ID NO.37所示;
(10)用于检测D型的探针的序列如SEQ ID NO.38所示。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:
所述用于检测乙型肝炎病毒6种突变型的第一组引物还包括:用于放大整体信号的SEQID NO.10所示的引物;
所述用于检测乙型肝炎病毒的3种基因型的第二组引物还包括:用于放大整体信号的SEQ ID NO.10所示的引物和放大B基因型信号的SEQ ID NO.14所示的引物;
所述用于检测乙型肝炎病毒的1896A型和204I-ATT型的第三组引物还包括:用于放大1896A型信号的SEQ ID NO.23所示的引物。
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