[发明专利]一种乙型肝炎病毒耐药性和基因型的检测试剂盒与检测方法有效

专利信息
申请号: 201410514984.5 申请日: 2014-09-29
公开(公告)号: CN105441584B 公开(公告)日: 2019-02-05
发明(设计)人: 孙兰华;刘莹莹;张冠斌;项光新;邢婉丽 申请(专利权)人: 北京博奥晶典生物技术有限公司;清华大学
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6858;C12R1/93
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;陈晓庆
地址: 101111 北京市北京经济*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 乙型肝炎 病毒 耐药性 基因型 检测 试剂盒 方法
【权利要求书】:

1.一种用于检测乙型肝炎病毒的7种突变型和3种基因型的试剂盒,该试剂盒包括如下三组引物:

(1)用于检测乙型肝炎病毒6种突变型的第一组引物,包括:

所述乙型肝炎病毒6种突变型为180M型、181T型、181V型、204I-ATC型、204V型和236T型;

a、用于检测180M型的引物为:SEQ ID NO.4所示的正向引物和用于与正向引物配对的SEQ ID NO.9所示的引物;

b、用于检测181T型的引物为: SEQ ID NO.5所示的和SEQ ID NO.8中第22-42位核苷酸分子所示的正向引物,与正向引物配对的SEQ ID NO.9所示的引物;

c、用于检测181V型的引物为:SEQ ID NO.3所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.9所示的引物;

d、用于检测204I-ATC型的引物为:SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.6所示的正向引物,与正向引物配对的SEQ ID NO.9所示的引物;

e、用于检测204V型的引物为:SEQ ID NO.2所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.9所示的引物;

f、用于检测236T型的引物为:SEQ ID NO.7所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.9所示的引物;

(2)用于检测乙型肝炎病毒的3种基因型的第二组引物,包括:

所述乙型肝炎病毒的3种基因型为HBV/B型、HBV/C型和HBV/D型;

g、用于检测HBV/B型的引物为:SEQ ID NO.13所示的正向引物,与正向引物配对的SEQID NO.17所示的和SEQ ID NO.18所示的引物;

h、用于检测HBV/C型的引物为:SEQ ID NO.15所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.19所示的引物;

i、用于检测HBV/D型的引物为:SEQ ID NO.16所示的正向引物和与正向引物配对的SEQID NO.20所示的引物;

(3)用于检测乙型肝炎病毒的1896A型和204I-ATT型的第三组引物,包括:

j、用于检测1896A型的引物为:SEQ ID NO.22所示的正向引物,与正向引物配对的SEQID NO.24所示的、SEQ ID NO.25所示的和SEQ ID NO.26所示的引物;

k、用于检测204I-ATT型的引物为:SEQ ID NO.21所示的正向引物和与正向引物配对的SEQ ID NO.27所示的引物;

所述试剂盒还包括连接有探针的基因芯片,所述探针与标签序列一一对应和特异结合;

所述探针的序列如下:

(1)用于检测1896A型的探针的序列如SEQ ID NO.28所示;

(2)用于检测204I型的探针的序列如SEQ ID NO.29所示;

(3)用于检测180M型的探针的序列如SEQ ID NO.31所示;

(4)用于检测236T型的探针的序列如SEQ ID NO.32所示;

(5)用于检测181T型的探针的序列如SEQ ID NO.33所示;

(6)用于检测181V型的探针的序列如SEQ ID NO.34所示;

(7)用于检测204V型的探针的序列如SEQ ID NO.36所示;

(8)用于检测B型的探针的序列如SEQ ID NO.30所示;

(9)用于检测C型的探针的序列如SEQ ID NO.37所示;

(10)用于检测D型的探针的序列如SEQ ID NO.38所示。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:

所述用于检测乙型肝炎病毒6种突变型的第一组引物还包括:用于放大整体信号的SEQID NO.10所示的引物;

所述用于检测乙型肝炎病毒的3种基因型的第二组引物还包括:用于放大整体信号的SEQ ID NO.10所示的引物和放大B基因型信号的SEQ ID NO.14所示的引物;

所述用于检测乙型肝炎病毒的1896A型和204I-ATT型的第三组引物还包括:用于放大1896A型信号的SEQ ID NO.23所示的引物。

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