[发明专利]一种含氯(2R,3S)甲基丙酸甲酯的生产方法

权利要求书

1.一种南极假丝酵母细胞生物还原制备(?)-(2R,3S)-3-羟基-3-（4-氯苯基）-2-甲基丙酸甲酯的方法，其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.6-0.7，pH为6.3，加入吸附底物的棉纱布，使底物2-（4-氯苯甲酰)-2-丙烯酸甲酯添加量为80-90 g/L，葡萄糖含量为 8-9g/L，木糖6-7 g/L，单硬脂酸甘油酯含量为12-15g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至24-25℃时，加入湿酵母细胞使浓度为22-25g/L，通气比为0.10-0.12V/（V分钟），进行生物还原反应，反应时间为80-85小时；反应结束后，分别滤出细胞、棉纱布，用乙酸乙酯萃取反应液、萃取棉纱布，合并乙酸乙酯萃取液和萃取棉纱布的乙酸乙酯，蒸出乙酸乙酯，得到产物(?)-(2R,3S)-3-羟基-3-（4-氯苯基）-2-甲基丙酸甲酯，反应转化率94-96％，产品收率92-94％，对映体过量率（ee%）97-98％。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于湿酵母细胞制备过程如下：南极假丝酵母经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液；发酵罐加入培养液，装料系数为0.6-0.7，121℃高压灭菌30分钟，冷却至24-25℃，将酵母种子液接种至发酵罐，接种比例为9-10％，通气比为1-1.3V/（V分钟），24-25℃培养49-54小时，用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞，用作生物还原反应催化剂。

3.权利要求1所述的方法，其特征在于培养液成份为：葡萄糖18-20 g/L，淀粉13-15g/L,黄豆粉28-29 g/L，酵母浸膏6-7 g/L，吐温80 0.6-0.8 g/L ， KH₂PO₄ 2-2.4 g/L，MgSO₄.7H₂O 0.3-0.4 g/L，豆油20-25 mL/L，麦芽浸膏26-30 g/L； 固体培养基成份： 在液体培养基中加入2%的琼脂粉。

4.权利要求1所述的方法，其特征在于所述吸附底物的棉纱布制作方法为，将底物溶于乙酸乙酯，底物与乙酸乙酯的比率为0.5：2，得到底物的乙酸乙酯溶液，用尺寸为0.5cmX0.5cm的棉纱布吸收此溶液，然后，烘干、回收乙酸乙酯，即得到吸附底物的棉纱布，调节底物与棉纱布用量，使得底物与棉纱布的质量比率为0.3-0.32。