[发明专利]铁线莲优雅紫的组织培养方法

权利要求书

1.一种铁线莲优雅紫的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)获取无菌苗材料：

于春季剪取铁线莲新萌发的带芽茎段，自来水下冲洗30-60min后于超净工作台上，用体积浓度70—75％的乙醇浸泡15-20s，再用质量浓度1％的升汞溶液浸泡8-15分钟后，用无菌水冲洗5-8次，吸干带芽茎段表面水分；

(2)初代培养：

取上述无菌处理后的带芽茎段，切成1cm长的小段，每段上至少带一枚发育饱满，无病虫危害状健康芽，接种于pH值为5.6-6.0的诱导培养基上，所述带芽茎段在诱导培养基诱导培养后7天开始产生丛生芽，继续培养4周后，进行步骤(3)的继代增殖培养；

(3)增殖培养：

带有丛生芽的铁线莲接种于pH值为5.8-6.2的不定芽增殖培养基上进行增殖培养，增值培养30天，每日光照16h，增殖培养温度为24-26℃，光照强度为30-40μmol/m²s；

(4)生根壮苗培养：

在步骤(3)中不定芽增殖培养基中诱导出丛生芽后，将丛生芽切分成单株或2.0-3.5cm长的茎段，接种于pH5.6-6.0的生根壮苗培养基中，暗培养7-10天后进行光照培养；当根长为2-4cm时,可进行驯化移栽。

2.根据权利要求1所述的铁线莲优雅紫的组织培养方法，其特征在于，所述的诱导培养基成分为1/2MS+0.2mg/L6-BA+0.5mg/LKT+0.05mg/LNAA+3％(质量浓度)蔗糖+0.7％(质量浓度)琼脂；pH值为5.8。

3.根据权利要求1所述的铁线莲优雅紫的组织培养方法，其特征在于，所述的增殖培养基成分为1/2MS+0.2mg/L6-BA+0.5mg/LKT+0.05mg/LNAA+3％(质量浓度)蔗糖+0.7％(质量浓度)琼脂+10％(质量浓度)椰汁+0.1mgVc。

4.根据权利要求1所述的铁线莲优雅紫的组织培养方法，其特征在于，所述的生根培养基成分为1/3MS+NAA0.1-0.5mg.L^-1+0.5g活性炭。

5.根据权利要求2-4任一项权利要求所述的铁线莲优雅紫的组织培养方法，其特征在于，所述的其中，MS的配方如下：

大量元素(mg/l)包括：

微量元素(mg/l)包括：

铁盐(mg/l)包括：

FeSO₄·7H₂O         27.8

Na₂-EDTA·2H₂O      37.3；

有机物质(mg/l)包括：