[发明专利]一种台湾桤木的组织快繁方法

说明书

技术领域

本发明属于组织培养的植物再生领域，特别涉及台湾桤木的组织培养方法。 

背景技术

近年来，随着重庆的经济快速发展和人们对木材产品的消费增加，木材、纸浆等原料的需求大增，而重庆本地木材原料的供给缺口很大。为了满足木材加工产业的需要，重庆一直以引进的速生桉和杨树为主大力发展短周期工业原料林，但是桉树原产热带，其耐寒性和对碱性紫色土的适应性较差，渝东南、三峡库区海拔1000m以上和渝西大面积的紫色土地区不适合发展速生桉树种；而长期的试验研究也表明杨树在重庆的生长受到立地条件的很大限制，不适合大面积推广和发展。因此研究开发出乡土、适生范围广、以用材为主要目的的树种，成了木材加工业产业链攻关任务中的首要环节。 

台湾桤木(Alnus formosana.Makino)为桦木科(Betulaceae)桤木属(Alnus B.Ehm)的落叶阔叶大乔木，为非豆科菌根树种，原产于中国台湾，是国际公认的优良工业原料林树种。台湾桤木适应性强、速生、材质好，适应在碱性紫色土环境生长，耐寒性较强，根系发达且有根瘤，具有较强的固氮能力，种植后还可改良土壤。栽植试验表明，相同立地条件下，台湾桤木和杨树两者树高生长无明显差异，而桤木平均胸径比杨树大1/3以上，台湾桤木整体的生产量和生长速度高于杨树。其优良的特性正好能够弥补目前我市速封林发展中的一些不足，在重庆地区将有很大的推广和发展空间，是一种十分重要的用材树种，很有开发利用价值。引种台湾桤木，不仅可丰富我国南方人工阔叶林种类，改良土壤，治理环境，而且有较高的经济价值，具有广阔的推广前景。台湾桤木在重庆、福建、四川等南方广大地区得到迅速推广。目前，台湾桤木繁殖主要采用实生苗繁殖，其遗传保守性弱，个体差异大，育苗受季节限制，且难以对优株进行快速繁殖，已不能满足市场对优质台湾桤木种苗的需求。 

发明内容

单靠实生苗繁殖已不能满足市场对优质台湾桤木种苗的需求，本发明的目的在于提供一种有效方法实现台湾桤木的规模化育苗。 

本发明的目的是通过以下措施实现的： 

一种台湾桤木组织快繁的方法，步骤包括无菌体系建立、增殖培养、生根培养、炼苗移栽，其特征在于：增殖继代培养基包括0.5mg/L的6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、0.15mg/L的KT(激动素)、0.2mg/L的IBA(吲哚丁酸)，pH值为5.8。进一步地，所述增殖培养基还包括MS(Murashige and Skoog Stock)培养基、30g/L蔗糖和7g/L卡拉胶，调节pH值至5.8。激素是植物组织培养中的必需物质，同不定芽的诱导密切相关。不同激素组合对不同植株的不定芽诱导的影响不同。本发明的增殖培养基配方不仅有利于提高桤木的增殖系数，同时诱导的不定芽多而效果佳，长势好无玻璃化现象，有利于生根和移栽，提高存活率和存活质量。 

上述生根培养的培养基配方包括0.2mg/L的IBA(吲哚丁酸)、0.2mg/L的NAA(萘乙酸)、0.2mg/L的IAA(吲哚乙酸)。进一步的，生根培养基还包括1/2MS培养基、30g/L蔗糖，PH值为5.8。使植株有效生根，30天生根率可达90％，且生根的条数、粗壮度均良好，根系平均数量为7.8条，植株叶片油绿，长势好。 

上述无菌体系建立，采用0.1％升汞处理7min后，75％酒精处理10s，再1.5％浓度的CaCl₂处理。外植体灭菌时间和灭菌方式对外植体灭菌成活率影响较大，以无菌CaCl₂(氯化钙)溶液能降低褐化率。本发明组织快繁的外植体为台湾桤木顶部带芽茎段，带芽茎段长度为0.8～1.5cm。台湾桤木组培快繁技术的难点在于茎段外植体无菌体系建立。桤木茎段的表面有绒毛，且有2枚芽鳞，灭菌难度较大。同时，以桤木茎段为外植体易产生褐化，易造成植株死亡。本发明以春季即将萌动的幼嫩顶芽为最佳外植体，植株的苗龄越小越有利于后续外植体增殖启动诱导。 

本发明所述台湾桤木的组培快繁方法，是通过对台湾桤木的离体培养，建立起台湾桤木的快速繁殖体系，包括以下步骤： 

(1)外植体无菌体系建立：用枝剪快速剪下0.8～1.5cm顶部带芽茎段，流水冲洗15min，备用；在超净工作台上灭菌，采用0.1％升汞处理7min+75％酒精处理10s+1.5％浓度的CaCl2冲洗，灭菌后转接入MS(Murashige and Skoog Stock)空白培养基。茎段外植体成活率为9.1％。