[发明专利]利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法

权利要求书

1.一种利用白玉米面为原料制备饲用沼泽红假单胞菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.制备菌种，方法是：

(1)菌种活化，采用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)AS1.2352，将沼泽红假单胞菌AS1.2352菌株接入玻璃培养皿内的ATYP琼脂液体培养基中，培养基液面上滴加液体石蜡封注液面，在28～30℃下，用40W白炽灯距灯最下端距离15-25cm处照射，厌氧静置培养5d～7d，得活化菌种；

(2)种子培殖，方法是：首先配制种子用培养基，将甘油1.0g、酵母膏1.0g、磷酸氢二钾0.3g，微量元素溶液0.05mL，维生素溶液0.15mL，水1000mL混合配制成培养基，将培养基装入培养皿中，每250ml的容积内装入培养基100mL，在0.1Mpa灭菌30min，灭菌后冷却至30℃备用；然后，将步骤(1)得到的活化菌种接种于已灭菌冷却后的培养基中，接种量为每250mL的容积内接入培养基重量的3～5％，在转速80r/min，28～30℃条件下培养60～72h，得到种子，革兰氏染色阴性，镜检无杂菌，种子液OD₆₆₀值达到0.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到0.5×10⁸个/mL以上；

B.制备饲用沼泽红假单胞菌，方法是：

(1)制备液体发酵培养基：白玉米面2.0g、酵母膏1.0g和水1000mL，其中，白玉米面过0.42mm孔径筛，用部分水润湿，酵母膏再取部分水溶解成酵母膏溶液，然后润湿的白玉米面及酵母膏溶液混合均匀加入10L发酵罐内，并补加入剩余的水，罐压控制在0.1～0.11Mpa之内，在位灭菌30min得灭菌后的液体发酵培养基；

(2)接种，将液体发酵培养基冷却至30℃，罐内压力减至0.01Mpa以下，接入步骤A中得到的种子，接种比例为液体发酵培养基重量的3～5％；

(3)发酵培养，将已冷却接种的液体发酵培养基装入10L发酵罐中，液体发酵培养基的装液量为7L，使罐压保持在0.03～0.05Mpa之间，控制调节发酵温度28～30℃，搅拌转速100r/min，通入发酵罐的无菌空气流量为1.5NL/min，发酵时间72～96h，得沼泽红假单胞菌发酵液，镜检无杂菌，发酵液OD₆₆₀值达到1.5以上，沼泽红假单胞菌菌数达到5×10⁸个/mL以上；

(4)载体吸附，用麸皮为载体，吸附沼泽红假单胞菌发酵液，得固体饲用沼泽红假单胞菌；

(5)烘干，在温度35-50℃下将固体饲用沼泽红假单胞菌烘干，粉碎：过0.42mm孔径筛，分装即可。