[发明专利]一对转录激活子样效应因子核酸酶及其编码序列与应用有效
| 申请号： | 201410525903.1 | 申请日： | 2014-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN105440111B | 公开（公告）日： | 2019-08-13 |
| 发明（设计）人： | 刘楚新;刘欢;肖丽萍;李飞达;张兴举;王俊 | 申请（专利权）人： | 深圳华大基因研究院;深圳华大基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C12N15/11;C12N9/22;C12N15/62;C12N15/55;C12N15/89;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋;杨晞 |
| 地址： | 518083 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一对 转录 激活 效应 因子 核酸酶 及其 编码 序列 应用 | ||
1.一对多肽，其特征在于，其中一条多肽具有如SEQ ID NO：1所示氨基酸序列，另一条多肽具有如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列；
其中一条多肽特异性识别如SEQ ID NO:3所述的核苷酸，另一条多肽特异性识别如SEQID NO:4所述的核苷酸。
2.一对多核苷酸1，其特征在于，选自以下组：
(1)编码如权利要求1所述一对多肽的一对多核苷酸；
(2)分别具有如SEQ ID NO:5所示核苷酸序列，以及如SEQ ID NO:6所示核苷酸序列。
3.一对融合蛋白，其特征在于，由权利要求1所述的一对多肽分别与DNA切割元件的两个单体或两个亚基融合而成，所述DNA切割元件需要两个单体或两个亚基的聚集以行使DNA切割功能。
4.根据权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述DNA切割元件为核酸酶FokI。
5.根据权利要求4所述的融合蛋白，其特征在于，所述一对融合蛋白分别具有如SEQ IDNO：7所示氨基酸序列，以及如SEQ ID NO：8所示氨基酸序列。
6.一对多核苷酸2，其特征在于，选自以下组：
(1)编码如权利要求3-5中任一项所述一对融合蛋白的一对多核苷酸；
(2)分别具有如SEQ ID NO:9所示核苷酸序列，以及如SEQ ID NO:10所示核苷酸序列。
7.一种包含如权利要求6所述一对多核苷酸2中的任意一条多核苷酸的载体。
8.根据权利要求7所述的载体，其特征在于，在所述多核苷酸的上游还包括编码核定位信号的核苷酸序列。
9.一种用权利要求7或8所述载体转化的宿主细胞。
10.一种如权利要求3-5中任一项所述一对融合蛋白或如权利要求6所述的一对多核苷酸2在对小鼠的Ace2基因靶向敲除中的应用。
11.一种小鼠大肠炎模型的构建方法，包括：将如权利要求3-5中任一项所述一对融合蛋白、如权利要求6所述一对多核苷酸2或分别含有如权利要求6所述一对多核苷酸2的载体转入小鼠的受精卵。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，分别将如权利要求6所述一对多核苷酸2体外转录成相应的mRNA，之后将所述mRNA注射小鼠的受精卵。
13.根据权利要求11或12所述的方法，其特征在于，其中，如权利要求6所述一对多核苷酸2的各自的上游还包括编码核定位信号的核苷酸序列，以将核定位信号引入转录后的mRNA中。
14.一种试剂盒，其包括如权利要求1所述的一对多肽，或如权利要求2所述的一对多核苷酸1，或如权利要求3-5中任一项所述的一对融合蛋白，或如权利要求6所述的一对多核苷酸2，或如权利要求7或8所述的载体，或如权利要求9所述的转化的宿主细胞。
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