[发明专利]一种甲磺酸达比加群酯含量的检测方法

说明书

技术领域

本发明属医药技术领域，具体而言，主要涉及甲磺酸达比加群酯含量的检测方法。

背景技术

达比加群酯（Pradaxa）是德国勃林格殷格翰公司研发生产的口服直接凝血酶抑制剂，它是达比加群（Dabigatran）的前体药物，甲磺酸达比加是在达比加的基础上经过磺化反应生成的产物。于2008年4月首次在德国和英国上市。达比加群酯具有直接抗凝血活性，与其他药物作用少，可直接口服，无需进行凝血测试，也不用改变饮食习惯，是预防中风的推荐药物。2008年欧盟获准用于全髋或全膝关节置换术后静脉血栓的预防，2010年FDA批准用于降低非瓣膜性房颤患者预防血栓和脑卒中的发生。甲磺酸达比加群酯是及华法林之后50年来首个上市的全新口服直接抗凝血药物，是抗凝血治疗领域和潜在致死性血栓领域的一项重大突破。

进口药品注册标准中的检测方法流速太大，对于硬件要求较高，而且峰纯度因子小于990，峰不纯。目前尚没有甲磺酸达比加群酯的有效检测方法，为了便于合成人员分析产率，特研究该分析方法，能够简单、快速而准确的测定其含量。

发明内容

本发明的目的在于公开一种有效且简单的检测甲磺酸达比加群酯含量的方法，能更好地对甲磺酸达比加含量进行控制，指导工艺研究，提高产品质量。

一种甲磺酸达比加群酯含量的检测方法，具体的步骤如下：

1）色谱条件：HPLC法测定甲磺酸达比加群酯的色谱条件如下，色谱柱：phenomenex Gemini C18（150×4.6mm,5μm）；流动相：A：0.01mol/L的乙酸铵水溶液，乙酸调节pH至6.5；B ：甲醇；A：B=35：65等度洗脱；流速，1ml/min；柱温：30℃；DAD检测器；检测波长272nm进样量：10μl。

2）检测溶液的配制：

对照品溶液：精密称取甲磺酸达比加群酯对照品适量，用甲醇溶解，定容，制成每1ml中含甲磺酸达比加群酯1mg的溶液；

供试品溶液：精密称取甲磺酸达比加群酯供试品适量，用甲醇溶解，定容，制成每1ml中含供试品1mg的溶液。

分别精取对照液和供试液各10μl，注入色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得甲磺酸达比加群酯的标示量。

本发明的优点在于：

通过有效的高效液相色谱法，检测甲磺酸达比加群酯的含量，对其含量进行精确检测，有利于优化工艺，提高产品质量。

附图说明

图1为甲磺酸达比加群酯供试品的色谱图；

图2为甲磺酸达比加群酯对照品色谱图；

图3为甲磺酸达比加群酯浓度与峰面积线性图。

具体实施方式

实施例1

准确称取10mg甲磺酸达比加群酯标准品溶于10ml容量瓶中， 用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为 1mg/ml 的标准溶液。

按上述方法准确配制育亨宾标准溶液， 经 0.2μm 微孔滤头过滤后注入液相色谱仪中，按本发明确定的方法。所述的5个不同浓度的育亨宾标准溶液分别为0.8mg/ml，0.9mg/ml，1.1mg/ml，1.2mg/ml。以峰面积 (Y) 为纵坐标，样品浓度 (X) 为横坐标进行线性回归， 得 r ＝ 0.999， 线性关系很好， 见图3。

其中，色谱柱：phenomenex Gemini C18（150×4.6mm,5μm）；流动相：A：0.01mol/L的乙酸铵水溶液，乙酸调节PH至6.5；B ：甲醇；A：B=35：65等度洗脱；流速，1ml/min；柱温：30℃；DAD检测器；检测波长272nm进样量：10μl。

色谱条件：HPLC法测定甲磺酸达比加群酯的色谱条件如下，色谱柱：phenomenex Gemini C18（150×4.6mm,5μm）；流动相：A：0.01mol/L的乙酸铵水溶液，乙酸调节PH至6.5；B ：甲醇；A：B=35：65等度洗脱；流速，1ml/min；柱温：30℃；DAD检测器；检测波长272nm进样量：10μl。

1）试验针对色谱柱的柱温、流速、流动相A（缓冲盐）pH进行了一系列的条件筛选。首先，将色谱柱的柱温在原有30℃的条件下分别升高和降低5℃进行试验，结果发现，柱温在30℃时，甲磺酸达比加群酯（以下用DEM表示）色谱条件最佳。