[发明专利]一种多功能靶向异长春花碱脂质体及其制备方法

权利要求书

1.一种多功能靶向异长春花碱脂质体，其特征在于，所述的脂质体由异长春花碱、脂材及功能性靶向配体组成；所述脂质体为双分子层结构，内部具有水溶性空腔；所述异长春花碱包封在脂质体水溶性空腔中；所述脂材由卵磷酯（DPPC）、胆固醇（CHOL）、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺组成；所述的聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺为DSPE-PEG₂₀₀₀；所述功能性靶向配体由脂质体表面的修饰物和脂质体双分子层中的靶向材料组成；所述脂质体双分子层中的靶向材料为粉防己碱，所述粉防已碱包封在脂质体双分子层中；所述脂质体表面的修饰物为伐普肽-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯（TPGS₁₀₀₀-VAP）与胆固醇-聚乙二醇-聚乙烯亚胺（CHOL-PEG-PEI），所述TPGS₁₀₀₀-VAP通过酰化反应修饰在脂质体的表面，所述CHOL-PEG-PEI通过缩合反应修饰在脂质体的表面。

2.如权利要求1所述的多功能靶向异长春花碱脂质体，其特征在于：所述DPPC、CHOL、DSPE-PEG₂₀₀₀、TPGS₁₀₀₀-VAP及CHOL-PEG-PEI的物质的量之比为（55-65）:（18-22）:（3-3.5）:（1.3-1.8）:（1.3-1.8）。

3.如权利要求1所述的多功能靶向异长春花碱脂质体，其特征在于：所述异长春花碱与脂材的物质的量为1:50-1:70，所述粉防己碱与脂材的物质的量为1:10-1:30。

4.如权利要求1所述的多功能靶向异长春花碱脂质体，其特征在于：所述伐普肽-聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯（TPGS₁₀₀₀-VAP）是由伐普肽（VAP）中的氨基与经戊二酸活化的聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯的羧基（TPGS₁₀₀₀-COOH）发生酰化反应合成的；所述TPGS₁₀₀₀-VAP为共轭化合物，所述酰化反应的缩合剂为碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS），所述酰化反应的温度为20-25℃、时间为20-24h，所述酰化反应在二甲基亚砜（DMSO）溶剂中进行，所述酰化反应中VAP、TPGS₁₀₀₀-COOH、EDC、NHS的摩尔比VAP:TPGS₁₀₀₀-COOH:EDC:NHS=1:1:8:8。

5.如权利要求1所述的多功能靶向异长春花碱脂质体，其特征在于：所述胆固醇-聚乙二醇-聚乙烯亚胺（CHOL-PEG-PEI）是由聚乙烯亚胺（PEI）中的氨基与胆固醇-聚乙二醇-NHS（CHOL-PEG-NHS）中的N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）发生缩合反应合成的；所述CHOL-PEG-PEI为共轭化合物，所述缩合反应的温度为20-25℃，时间为30-36h，所述的缩合反应在二甲基甲酰胺（DMF）溶剂中进行，DMF溶液用N-甲基吗啉调节pH为8.5-9.5，所述缩合反应中PEI、CHOL-PEG-NHS的摩尔比为PEI:CHOL-PEG-NHS=5:1。

6.权利要求1-5任一所述的多功能靶向异长春花碱脂质体的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤1、粉防己碱、TPGS₁₀₀₀-VAP、CHOL-PEG-PEI及脂材溶解于氯仿中，旋转蒸发除去氯仿，得到脂膜；

步骤2、将所述脂膜用硫酸铵溶液水化，水化液超声10min，然后使用脂质体挤出仪分别挤过400nm、200nm和100nm孔径的滤膜各3次，制备空白多功能靶向脂质体；

步骤3、将所述空白多功能靶向脂质体密封于透析袋中，置磷酸盐缓冲液（PBS）中透析3次，每次12h；所述透析袋的截留值10000-12000 Da；

步骤4、取处方量的异长春花碱，加至透析后的空白多功能靶向脂质体，置40℃恒温振荡器中，100r/min振摇30min，得到多功能靶向异长春花碱脂质体。