[发明专利]一对靶向斑马鱼Forkhead box n1基因的Talen识别序列及其mRNA制备方法

权利要求书

1.一对靶向斑马鱼Forkhead box n1基因的Talen识别序列，其特征在于，所述识别序列对的基因序列分别如序列表SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

2.一对用于合成靶向敲除斑马鱼Forkhead box n1基因的Talen蛋白的表达载体对，所述表达载体含有权利要求1所述的识别序列。

3.根据权利要求2所述的表达载体对，其特征在于，所述载体为pCS2-Foxn1-FOK1-L和pCS2-Foxn1-FOK1-R，分别对应所述靶标序列两段的识别序列。

4.一种用于靶向敲除斑马鱼Forkhead box n1基因的mRNA制备方法，其特征在于，包括以下步骤:

a)组装并合成权利要求1所述的Talen识别序列对；

b)根据a)的所述的Talen识别序列对，构建靶向Forkhead box n1基因的基因敲除效应蛋白Talen的表达载体对pCS2-Foxn1-FOK1-L和pCS2-Foxn1-FOK1-R；

c)将步骤b)获得的载体通过脂质体转染，在293T细胞内检测蛋白表达情况；

d)将步骤b)获得的载体通过过体外转录，获得所述的用于靶向敲除斑马鱼Forkheadboxn1基因的mRNA。

5.权利要求4所述的用于靶向敲除斑马鱼Forkheadboxn1基因的mRNA制备方法获得的mRNA，在敲除斑马鱼Forkhead box n1基因中的应用。

6.权利要求4所述的用于靶向敲除斑马鱼Forkhead box n1基因的mRNA制备方法，在斑马鱼胸腺发育研究模型的应用。