[发明专利]一种二乙酰精胺的检测试剂盒及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物学检测方法，其特征在于具体的说是一种二乙酰精胺的检测试剂盒及制备方法和方法。

背景技术

诊断试剂在疾病的预防和诊断方面有很大的作用，作为生物制药的子行业，诊断试剂在20多年的发展过程中，其应用范围不断扩大，在疾病的预防和愈后的检测中正发挥着越来越大的作用，商业价值也不断凸显。2010年我国诊断试剂行业在新医改、国家在生物医药领域重点扶持诊断试剂行业发展的背景下，我国诊断试剂市场规模达到40亿元人民币左右。目前我国诊断试剂的市场份额只仅占世界市场的2％左右，这与我国的人口数量和医疗需求是相当不匹配的，随着我国国民经济水平和健康意识的提高，这种差距将会成为诊断试剂行业增长的巨大空间。从国际上看，美国FDA已批准的诊断试剂近700种，名列世界各国之首，但与世界卫生组织所属全球疾病统计分类协会宣布的全球已确知的12000种疾病相比，需求潜力仍非常大。国内临床检验市场经过几年的快速发展，一些重要的临床产品项目已经进入成熟期，发展速度有所减缓，但仍然有20％～30％的增长。目前，同国际上的几百种产品相比，国内市场还远没有得到开发，具有巨大的市场潜力。即使从目前需求较大、发展比较成熟的几个病种来看，市场仍有很大的发展潜力。

体外诊断行业是一个充满活力和前景的领域。目前，全球体外诊断产业规模在200亿美元的水平。另外，老年人口群体的不断扩大，分子诊断学技术日益进步，都给体外诊断市场的发展带来了积极的影响。我国已批准上市的免疫诊断试剂有387种，这些产品主要集中在肝炎及性病的临床诊断上，仅乙肝一项就占了62％，说明国内的体外诊断试剂品种比较单一。国内体外诊断试剂行业在基础技术研究方面投入较少，几乎没有自己的专利技术和知识产权。一些国内产品不能跨出国门，国际竞争力非常弱。

癌症是一个全球性公共健康问题。尤其在中国这样一个发展中国家，医学和卫生水平均不及西方发达国家先进，肿瘤发病率很高并且仍在继续升高，其中很大一部分由于发现不及时造成发现时即为晚期，错过了最佳治疗时间。所以如果能在肿瘤发生的早期检测出相关指标，就能做到肿瘤的早期发现、早期诊断、早期治疗，就可以大大降低肿瘤患者的死亡率，全面提高生存质量和生活质量。同时，开发的体外诊断试剂也可以填补肿瘤体外诊断的国内空白。

目前，早期诊断癌症的最新、最有效的方法是通过验血检测肿瘤标志物，特别是其中的蛋白标志物。利用分子生物学、免疫学原理，制成能特异性检测肿瘤标志物的体外诊断试剂，能在早期准确的诊断癌症的发生，为治疗提供有效依据；针对个体差异，指导临床药物选择；以及在治疗后的疗效监测、预后和复发监测等方面都有重大意义。

发明内容

本发明目的在于提供一种二乙酰精胺的检测试剂盒及检测方法和方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种二乙酰精胺的检测试剂盒，包括试纸条干燥剂和吸管，试纸条从加样端依次为玻璃纤维素膜、金垫、NC膜、吸水纸；金垫上包被有胶体金标记的二乙酰精胺(DiAcSpm)和肌酐(CRE)的单克隆抗体及羊抗兔抗体；NC膜上的检测区(T)有DiAcSpm和CRE的抗原、标准区(C)有羊抗兔或羊抗鼠抗体。

所述DiAcSpm抗原为乙酰基精胺(AcSpm)同牛血清白蛋白(BSA)偶联所得；所述DiAcSpm抗体由乙酰基精胺(AcSpm)同牛血清白蛋白(BSA)偶联再免疫小鼠，而获得DiAcSpm单克隆抗体；所述CRE抗原为CRE同牛血清白蛋白(BSA)或牛甲状腺球蛋白(BTG)偶联所得；所述CRE抗体为CRE同牛血清白蛋白(BSA)或牛甲状腺球蛋白(BTG)偶联再免疫鼠或羊，而获得CRE单克隆抗体。

上述抗原和抗体也可通过市购获得。

所述金垫上包被有胶体金标记的二乙酰精胺(DiAcSpm)和肌酐(CRE)的单克隆抗体及羊抗兔抗体的制备采用铺金或喷金的方式获得。

所述铺金或喷金的方式，分别向经调整PH值的胶体金中加入DiAcSpm和CRE的单克隆抗体，以及兔抗体，静置5-15min后分别加入20％BSA进行封闭，再次静置5-15min,静置后分别离心收集沉淀，所得沉淀再分别用复溶液复溶，所得复溶后的溶液混匀后均匀铺在或喷在玻璃纤维素膜或聚酯纤维素膜上，真空冻干、真空抽干或烘干后即得到包被有胶体金标记的二乙酰精胺(DiAcSpm)和肌酐(CRE)的单克隆抗体及羊抗兔抗体的金垫；