[发明专利]一种重组人GLP-1-Fc融合蛋白有效
| 申请号： | 201410531803.X | 申请日： | 2014-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN104327187B | 公开（公告）日： | 2018-06-08 |
| 发明（设计）人： | 许必雄;郭颀然;冯金梦 | 申请（专利权）人： | 上海兴迪金生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N5/10;C12N15/63;A61K39/395;A61K38/26;A61P35/00;G01N33/68 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 张艳 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 人免疫球蛋白 生物技术领域 氨基酸序列 生物学活性 结构功能 同源性 制备 | ||
1.一种重组人GLP-1-Fc融合蛋白，所述重组人GLP-1-Fc融合蛋白包括两个结构功能区域，分别为重组GLP-1片段和人免疫球蛋白的Fc片段，所述重组GLP-1片段的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述人免疫球蛋白的Fc片段的氨基酸序列如SEQ ID No：9所示，所述重组GLP-1片段和人免疫球蛋白的Fc片段之间还包括连接肽，所述连接肽的氨基酸序列如SEQID No：7或SEQ ID No：8所示，所述重组人GLP-1-Fc融合蛋白从N端到C端依次包括重组GLP-1片段、连接肽、人免疫球蛋白的Fc片段。
2.如权利要求1所述的重组人GLP-1-Fc融合蛋白，其特征在于，所述人免疫球蛋白的Fc片段为不具ADCC效应子功能的非裂解性Fc。
3.如权利要求1所述的重组人GLP-1-Fc融合蛋白，其特征在于，所述重组人GLP-1-Fc融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No：14、15所示。
4.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码如权利要求1-3任一权利要求所述的重组人GLP-1-Fc融合蛋白。
5.如权利要求4所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的多核苷酸序列如SEQ IDNo：22、23所示。
6.一种表达载体，含有如权利要求4-5任一权利要求所述的多核苷酸。
7.如权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体选自DHFR系统的表达载体和/或GS系统的表达载体。
8.如权利要求7所述的表达载体，其特征在于，DHFR系统的表达载体为pIRES-DHFR，GS系统的表达载体为pee12.4。
9.一种重组的宿主细胞，所述宿主细胞含有如权利要求6-8任一权利要求所述的表达载体、或者染色体中整合有权利要求4-5任一权利要求所述的多核苷酸。
10.如权利要求9所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞选自CHO-DXB11，CHO-DG44，CHO-S，CHO-K1中的一种或多种的组合。
11.如权利要求1-3任一权利要求所述的重组人GLP-1-Fc融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：
1)将重组人GLP-1-Fc融合蛋白的编码序列克隆至表达载体中；
2)将表达载体转染宿主细胞，培养并筛选出阳性细胞簇；
3)使用步骤2所得细胞表达所述融合蛋白，纯化后即得所述融合蛋白。
12.一种药物组合物，含有如权利要求1-3任一权利要求所述的重组人GLP-1-Fc融合蛋白及至少一种药学可接受的载体，所述药物组合物可被制备成片剂、胶囊、粉末、糖浆、溶液或悬浮液的药剂类型。
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