[发明专利]一种重组人GLP-1-Fc融合蛋白

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种重组人GLP‑1‑Fc融合蛋白及其制备方法和用途。本发明提供一种重组人GLP‑1‑Fc融合蛋白，所述重组人GLP‑1‑Fc融合蛋白包括两个结构功能区域，分别为重组GLP‑1片段和人免疫球蛋白的Fc片段，所述重组GLP‑1片段的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明所提供的重组人GLP‑1‑Fc融合蛋白，与原形GLP‑1分子同源性达到97%，且依然保持了优良的生物学活性和动物学活性。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种重组人GLP-1-Fc融合蛋白及其制备方法和用途。

背景技术

重组人胰高血糖素样肽-1类似物(GLP-1)，该多肽由31个氨基酸组成，能够刺激胰岛细胞产生胰岛素，从而达到控制血糖的目的。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)可促进胰岛素释放，降低血浆中的胰高血糖素水平，降低胃排空的速率，促进饱食感并刺激胰岛的生物合成和β细胞的增殖，可用于2型糖尿病的治疗。在我国2型糖尿病发病广泛，如果不及时加以治疗，容易转变成1型糖尿病，给患者和国家造成很大负担，因此开发这类药物的需求极为迫切。

目前商品化的GLP-1药物有美国礼来公司的艾塞纳肽(百泌达)和丹麦诺和诺德公司的利拉鲁肽(诺和力)，两者都已经在我国获得进口注册。两种药物都具有降血糖和减轻体重的作用，可广泛用于2型糖尿病的治疗。但是由于半衰期短，艾塞纳肽和利拉鲁肽都需要每天多次给药治疗，才能达到控制血糖的目的。所以，为了增加体内半衰期，使GLP-1长效化已经成为国内外研究的热点，目前研究的GLP-1及类似物长效化的方法主要有三种(1)PEG化长效，代表为Nove Nordisk公司(丹麦诺和诺德公司)研发的每周一次皮下注射的长效GLP-1类似物索玛鲁肽；(2)白蛋白融合蛋白，代表为专利CN10665538A；(3)抗体的Fc片段融合蛋白，代表为专利CN1802386B。

此外，礼来公司的GLP-1-Fc(LY2189265)目前正在美国三期临床阶段。根据临床实验的数据报道，LY2189265能够有效增加GLP-1的半衰期，使得原来的每天给药变成了每周一次给药，提高了病人的依从性。在LY2189265中，为了延长GLP-1分子的半衰期，礼来公司尝试把GLP-1与人的抗体Fc片段融合，GLP-1-Fc分子的半衰期明显增加，从原形的数分钟提高到将近4天，每周给药一次即可达到治疗2型糖尿病的目的。礼来公司的专利CN1802386B，对GLP-1分子(7-37)的三个氨基酸位点进行了突变，分别是第8位Ala改为Gly，第22位Gly改为Glu，第36位Arg改为Gly，这样与改构后的分子与天然分子的同源性只有90％。由于2型糖尿病患者需要长期用药，加上GLP-1-Fc具有半衰期延长的特点，使其在体内作用的时间也较原形GLP-1分子大大延长，使用同源性低的GLP-1分子与抗体Fc片段融合，有可能会因抗原改变而增加患者产生特异性抗体的风险。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种重组人GLP-1-Fc融合蛋白及其制备方法和用途，并进一步提供包含所述重组人GLP-1-Fc融合蛋白的药物组合物，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种重组人GLP-1-Fc融合蛋白，所述重组人GLP-1-Fc融合蛋白包括两个结构功能区域，分别为重组GLP-1片段和人免疫球蛋白的Fc片段，所述重组GLP-1片段的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

优选的，所述重组GLP-1片段和人免疫球蛋白的Fc片段之间还包括连接肽。

更优选的，所述重组人GLP-1-Fc融合蛋白从N端到C端依次包括重组GLP-1片段、连接肽、人免疫球蛋白的Fc片段。

更优选的，所述连接肽的氨基酸数量为≥2个，所述连接肽由甘氨酸(Gly)和丝氨酸(Ser)组合而成，采用以G4S(即氨基酸序列GGGGS)为单位的多单位连接实现。

更优选的，所述连接肽的氨基酸数量为6-36个。