[发明专利]以顶芽为启动材料的牛角瓜种苗组培快速扩繁的方法

权利要求书

1.以顶芽为启动材料的牛角瓜种苗组培快速扩繁的方法，按以下步骤进行：

    （1） 采集顶芽:选取牛角瓜优良单株上生长健状、尚未木质化的枝条，去除叶片，从顶芽下部3-4cm处剪断，保留顶芽部分3-4cm长，获得的顶芽进行下一步的消毒及培养；

    （2）顶芽伸长培养：将采集的顶芽进行消毒处理，去除叶柄、切除顶芽基部和顶端的褐化部分，控制顶芽长度在2-3cm之间，切除顶端褐化部分时需保留芽尖，两端褐化部分切除后，接种于顶芽启动培养基上，在启动培养条件下培养1周，顶芽开始生长，20天后将伸长生长的顶芽进行下一步的增殖培养；

     所述的启动培养基为MS+6-BA0.1-0.3mg/L+NAA0.1mg/L+0.1g/L活性碳+30g/L白沙糖，pH值5.8-6.0；

     所述的启动培养条件的光强为1500-2000Lx，光照时间为12小时/天，温度为23±2℃；

    （3）促腋芽快速增殖培养：将伸长生长的顶芽去顶后切成带1-2个节间的茎段，去除茎段上的叶柄，横放在增殖培养基上进行培养，25天后进行继代转接，此后，重复本步骤，快速增殖，芽苗增殖后进行生根培养；

所述的增殖培养基为MS+6-BA0.5-1.0mg/L+KT0.2 mg/L +NAA0.1mg/L+30g/L白沙糖，pH值5.8-6.0；所述的培养条件与步骤（2）相同；

   （4）丛生芽生根培养：将小苗单株切下，保留2-4个叶片，置于生根培养基进行培养，20天后生根培养生根率达100%，根系呈辐射状，单株平均根系10条以上；

     所述的生根培养基为1/2MS+IBA0.1-0.3mg/L+0.1g/L活性碳+15g/L白沙糖，pH值5.8-6.0，所述的培养条件与步骤（2）相同；

   （5）组培苗移栽和定植。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤（1）中所选取的牛角瓜优良单株上生长健状、尚未木质化的枝条为嫩枝。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征是步骤（3）所述的增殖培养的繁殖倍数为5倍以上。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征是步骤（5）所述的移栽和定植的组培苗根系长为2-4厘米，清洗粘附在根系上的培养基，移栽到消过毒的基质中，1个月后平均成活率达93%以上,3个月后用于造林；

所述的移栽基质为红心土:腐殖土:珍珠岩（体积比）=2:2:1。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征是步骤（5）所述的移栽和定植的组培苗根系长为2-4厘米，清洗粘附在根系上的培养基，移栽到消过毒的基质中，1个月后平均成活率达93%以上,3个月后用于造林；

所述的移栽基质为红心土:腐殖土:珍珠岩（体积比）=2:2:1。