[发明专利]一种高热稳定性的内切木聚糖酶及其应用

权利要求书

1.一种基因工程木聚糖酶，其特征在于，其基因序列为SEQ ID NO:3，蛋白序列为SEQ ID NO:4。

2.一种基因工程木聚糖酶，其特征在于，其是DtX酶截去了C端的碳水化合物结合结构域之后的突变体。

3.如权利要求2所述的基因工程木聚糖酶，其特征在于，其基因序列为SEQ ID NO:5，蛋白序列为SEQ ID NO:6；或基因序列为SEQ ID NO:7，蛋白序列为SEQ ID NO:8。

4.一种基因工程木聚糖酶，其特征在于，其是DtX酶截去了C端的碳水化合物结合结构域之后，又在C末端引入相互作用的突变体。

5.如权利要求4所述的基因工程木聚糖酶，其特征在于，所述引入的相互作用为二硫键。

6.如权利要求5所述的基因工程木聚糖酶，其特征在于，其基因序列为SEQ ID NO:9，蛋白序列为SEQ ID NO:10；或基因序列为SEQ ID NO:11，蛋白序列为SEQ ID NO:12。

7.一种制备基因工程木聚糖酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)构建目的蛋白基因；

2)构建基因工程菌并表达目的蛋白；

3)纯化目的蛋白；

其中，步骤1)中目的蛋白基因为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:11。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤2)在构建基因工程菌时，在重组目的蛋白的N端引入His-tag。

9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤3)的具体方法为将发酵后收获的宿主菌菌体悬液超声破碎后，放置于55-65℃热处理20-30分钟，沉淀大量杂蛋白，再经过一步Ni-NTA亲和层析处理后得到目的蛋白。

10.如权利要求1-6所述的基因工程木聚糖酶在工业生产中的应用。