[发明专利]一种沃尼妙林卵黄抗体的制备方法

权利要求书

1.一种制备沃尼妙林卵黄抗体的方法，包括如下步骤：通过碳二亚胺将盐酸沃尼妙林与载体蛋白进行偶联，得到免疫原；用免疫原免疫蛋鸡，得到免疫蛋鸡的鸡卵；提取鸡卵卵黄中的沃尼妙林卵黄抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述载体蛋白为牛血清白蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述用免疫原免疫蛋鸡的方法如下：将所述免疫原用等体积的弗氏完全佐剂乳化后首次免疫蛋鸡，再将首次免疫中所用的免疫原剂量减半，并用等体积的弗氏不完全佐剂乳化后对首次免疫的蛋鸡进行加强免疫。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：所述免疫的方式为背部多点免疫。

5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于：所述免疫原用PBS溶液溶解；

所述PBS溶液的浓度具体为0.01mol/L。

6.根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征在于：所述首次免疫的所述免疫原的剂量为300-400ug；

所述加强免疫的次数为7-8次，具体为7次。

7.根据权利要求1-6任一所述的方法，其特征在于：所述提取鸡卵卵黄中的沃尼妙林卵黄抗体的方法为饱和硫酸铵沉淀法，步骤如下：

1)将免疫蛋鸡的鸡卵中的卵黄与纯水混匀，调节pH至5.0-5.2，放置，得溶液1；

2)将溶液1离心，收集上清，加入pH 7.2-7.4的饱和(NH₄)₂SO₄水溶液，使饱和(NH₄)₂SO₄水溶液的体积占总体积的30-40％，放置，得溶液2；

3)将溶液2离心，取沉淀即得。

8.根据权利要求1-7任一所述的方法，其特征在于：所述卵黄和所述纯水的体积比为1:5-6，具体为1:6；

所述放置的条件为4℃-10℃放置12-20h，具体为4℃放置12-20h；

所述饱和(NH₄)₂SO₄水溶液占总体积的体积百分含量为40％。

9.由权利要求1-8任一所述的方法制备得到的沃尼妙林抗体。

10.权利要求9所述的沃尼妙林抗体在制备具有结合沃尼妙林的活性的产品中的应用；

或，

权利要求9所述的沃尼妙林抗体在制备检测沃尼妙林的产品中的应用。