[发明专利]一种抗体靶向修饰的阿尔茨海默病靶向药物递释复合物制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体地说，是一种抗体靶向修饰的阿尔茨海默病靶向药物递释复合物制备方法及其应用。

背景技术

阿尔茨海默病（AD）是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病，临床表现为认知和记忆功能不断恶化，日常生活能力进行性减退，并有各种神经精神症状和行为障碍。随着社会老龄化程度不断加剧，越来越多的老年人开始受到老年痴呆疾病的困扰，目前全世界患老年痴呆症的人数已近3000万，患病人数仍以每年460万的速度在增加。我国的患病人数约有500万，是世界上痴呆患者最多的国家之一。因此预防和治疗老年痴呆的研究有着重要的意义。

研究表明，β样淀粉蛋白（Aβ）聚集成淀粉样神经纤维是产生毒性的必要条件。淀粉样蛋白在细胞表面聚集是因为淀粉样前体蛋白APP在γ分泌酶的作用下产生的有毒性作用的多肽片段Aβ_1-42，疏水性的淀粉样蛋白Aβ_1-42与细胞表面的磷脂分子神经节苷脂ＧＭ１作用，在神经元细胞表面聚集成纤维状，插入磷脂双分子层，改变胆固醇水平，改变细胞膜的流动性及通透性，激活细胞表面相关信号分子，致使细胞内钙平衡紊乱，依次激活钙依赖性激酶、蛋白酶、脂肪酶、细胞内自由基生成，从而导致细胞损伤乃至死亡。人参皂苷Rb1是人参的主要有效成分，其可以明显提高体外培养神经元的活力，具有促进周围神经轴突生长、保护神经元的作用；人参皂苷能保护培养大鼠皮质神经细胞少受自由基损伤，增强神经元抗氧化能力，减轻氧自由基对神经元的损害。

连接特异性配体的聚合物载体可靶向至相应受体高表达的组织和细胞。脑主动靶向研究较广泛的受体有转铁蛋白受体、胰岛素受体、低密度脂蛋白受体、叶酸等。但有研究认为转铁蛋白并不是理想的脑部导向分子，转铁蛋白导向的药物与受体结合存在竞争抑制，受体基本被内源性转铁蛋白饱和，导致导向效率偏低。一种单克隆抗体mAb270能够靶向乙酰胆碱受体，可实现高效的脑转运。

氢化大豆卵磷脂和胆固醇具有生物可降解、生物相容性较好、毒性较低，形成的纳米尺寸双层脂质体可实现亲水性药物的包裹。同时抗体通过脂质体表面的活性基团很容易修饰到载体表面，实现载体向脑神经细胞的主动靶向。

本发明涉及的抗体靶向修饰的阿尔茨海默病靶向药物递释复合物，国内外尚未见类似的研究报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种阿尔茨海默病靶向药物递释复合物。

本发明的再一的目的是，提供一种阿尔茨海默病靶向药物递释复合物的制备方法。

本发明的另一的目的是，提供一种阿尔茨海默病靶向药物递释复合物的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种阿尔茨海默病靶向药物递释复合物，所述的靶向药物递释复合物以氢化大豆卵磷脂和胆固醇形成磷脂双分子层结构，将二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇穿插在磷脂双分子层，将水溶性药物包裹进脂质体中，并在脂质体表面修饰有抗体。

所述的水溶性药物为人参皂苷Rb1。

所述的脂质体表面的马来酸酐基团链接巯基化的抗体，所述的抗体为单克隆抗体mAb270。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种阿尔茨海默病靶向药物递释复合物的制备方法，所述的方法包括以下步骤：取氢化大豆卵磷脂、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇于1.5 ml的离心管中，65℃加热溶解于0.3 ml的乙醇溶液中，吸取于1 ml注射器中；取3 ml的250 mM的硫酸铵溶液于玻璃瓶中65℃加热，磁力搅拌下加入人参皂苷使其完全溶解；取出注射器，缓慢将注射器中的油相注入水相中，磁力搅拌10-15min形成包裹人参皂苷的脂质体；用巯基化的抗体与包裹人参皂苷的脂质体在常温搅拌下反应过夜，载体表面的马来酸酐活性基团与巯基化的抗体反应，最后用50K的透析膜将游离的抗体透析除去，制备得到抗体靶向药物纳米载体，即靶向药物递释复合物。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：所述的靶向药物递释复合物在制备治疗阿尔茨海默病的药物中的应用。

本发明优点在于：

本发明的靶向药物递释复合物(1)以氢化大豆卵磷脂、胆固醇和DSPE-mPEG2000为基本材料形成类似细胞膜结构的双层脂质体结构，借助脂质体中亲水成分与水溶性药物Rb1之间的相互作用，将药物包裹进脂质体中，形成纳米尺寸的载药体系；