[发明专利]一种抑制内源性因子X酶活性的寡糖类化合物及其药物组合物

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种由L-2,4-二硫酸酯基岩藻糖、D-葡萄糖醛酸、D-2-脱氧-2-乙酰氨基-4,6-二硫酸酯基-半乳糖、2,5-脱水塔罗糖或其糖醇、糖胺组成的化学结构纯净的寡糖类化合物，所述寡糖类化合物的制备方法，含所述寡糖类化合物的药物组合物以及它们作为内源性因子X酶抑制剂和/或肝素辅酶II依赖的凝血酶抑制剂在预防和/或治疗血栓性疾病中的应用。

背景技术

心脑血管疾病严重危害人类的健康，病理性血栓形成是心脑血管疾病的主要病因之一。包括抗凝药物在内的抗血栓药物广泛应用于心血管疾病的临床治疗。经典抗凝血药物，如香豆素类和肝素类药物，存在着出血倾向及药代动力学方面的缺陷。近二十年来，选择性的凝血酶与Xa抑制剂陆续应用于临床，但在降低出血倾向方面尚未取得突破性进展。目前，选择性的内源性凝血途径抑制剂的研究成为低出血倾向抗凝药物研究的主要方向之一，凝血因子XIIa、XIa及IXa抑制剂临床前及临床试验研究陆续展开。内源性Xase是内源性凝血途径上的末位和限速酶活位点，其选择性抑制剂具有重要的潜在临床应用价值。

现有研究显示，天然来源的岩藻糖取代的糖胺聚糖(Fucosylated Glycosaminoglycan,FG)具有强效的抗凝活性，且其抗凝机制与内源性Xase活性抑制相关(Thromb.Haemost.,2008,100:420–428；J.Biol.Chem.,1996,271:23973-23984)。然而，天然来源的原型FG还存在广泛而矛盾的药理作用，包括诱导血小板聚集、产生出血倾向和激活XII等(Thromb.Haemost.,1988,59:432-434；Thromb.Haemost.,1997,65:369–373；Thromb.Haemost.,2010,103:994-1004)。适当解聚的FG可降低血小板激活活性(Thromb.Haemost.,1991,65:369-373)。中国授权专利CN 101724086 B和CN 101735336 B公开了制备低聚FG的方法，其采用过氧化解聚法制备FG解聚产物，所得产物的出血倾向显著降低。此外，发明专利公开CN 103214591 A报道了FG的脱酰脱氨基解聚方法，该方法采用肼解法使FG所含N-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-D-半乳糖基(D-GalNAc)发生部 分脱乙酰化，继而通过亚硝酸处理使FG发生脱氨基解聚，由此获得含有末端2,5-脱水塔罗糖基(anTal)或其还原衍生物的FG解聚产物；而发明专利公开CN103145868 A报道了FG的β-消除解聚法，该方法首先部分酯化FG所含的D-葡萄糖醛酸(D-GlcUA)羧基，继而通过无水碱性溶剂处理获得非还原性末端为不饱和的Δ^4,5-己糖醛酸基(ΔUA)的FG解聚产物。

上世纪80年代至今的三十年中，无论是天然来源的原型FG，还是通过不同解聚技术获得的解聚产物，均为化学结构存在差异的系列化合物的混合物，而非具有相同化学结构的纯净化合物。这些混合物虽然可以用于血栓性疾病的治疗和/或预防，但限于其混合物性质，其质量可控性相对有限，混合物所含不同组分的化学结构差异所致药理药效活性差异以及副作用和安全性方面的顾虑难以避免，例如，这些混合物中所含的一定比例的大分子量组分可能存在XII激活活性和血小板激活活性。

由于FG化学结构复杂，特别是由于FG为高度硫酸化产物且其所含结构单元的硫酸化形式复杂多变，制备和纯化化学结构纯净的FG类化合物具有很高的技术难度，因此，迄今为止，尚无化学结构纯净的FG类化合物相关的研究报道。正是由于没有化学结构纯净的化合物报道，FG类化合物的确切结构仍存疑问，例如，侧链岩藻糖(L-Fuc)的存在形式(可能为单糖侧链或二糖侧链)及连接位置(可能为D-GlcUA的C3位、D-GalNAc的C4或C6位等)；与此相关，FG类化合物抑制内源性Xase所需的基本化学结构也没有得到深入的研究和充分的认识。

本发明惊奇地发现，采用侧链主要为α-L-2,4-二硫酸酯基-岩藻糖(L-2,4-disulfate-fucosyl-α1-,Fuc2S4S)的FG为起始原料，采用选择性裂解D-GalNAc-β1-4-D-GlcUA糖苷键的脱酰脱氨基解聚法解聚所述原料FG，继而综合采用凝胶色谱法、离子交换色谱法和/或超滤法纯化所得产物，本发明首次获得了一系列化学结构单一、纯净的FG类化合物。