[发明专利]一种水痘病毒抗体检测用抗原片制备方法

权利要求书

1.一种水痘病毒抗体检测用抗原片制备方法，其特征在于包括如下步骤：

水痘带状疱疹病毒病毒感染VZV易感细胞，置35℃培养箱培养至病毒复制高峰，经胰蛋白酶消化，进行细胞计数，选择适宜的细胞数量制备病毒细胞悬液，将细胞悬液滴入12孔载玻片上，经35℃培养、清洗、冷丙酮固定干燥后，保存于-20~-70℃。

2.此方法制备的抗原片可用于水痘-带状疱疹病毒抗体的测定。

3. 根据权利要求1所述的水痘病毒抗体检测用抗原片制备方法，其特征在于：感染用水痘带状疱疹病毒株优选为水痘带状疱疹病毒VZV 84-7株。

4. 根据权利要求1所述的水痘病毒抗体检测用抗原片制备方法，其特征在于：所采用的细胞基质优选为Vero细胞，细胞密度2.5—3.5×10⁵/ml之间。

5. 根据权利要求1所述水痘病毒抗体检测用抗原片制备方法，其特征在于：用于感染细胞毒种的病毒滴度在4.9-5.2lgPFU/ml之间；感染复数（MOI）为0.01-0.05。

6. 根据权利要求书1所述的水痘病毒抗体检测用抗原片制备方法，其特征在于：病毒细胞悬液细胞计数在1.2-1.8×10⁵/ml之间。

7. 一种水痘病毒抗体检测用抗原片制备方法，具体步骤如下：

选择生长至单层的Vero细胞，密度约为2.5—3.5×105/ml；水痘带状疱疹病毒株VZV 84-7病毒滴度为4.9-5.2lgPFU/ml；以感染复数0.01-0.05感染细胞；病毒感染液为含1%谷氨酰胺、2%新生牛血清的MEM，用5.6%NaHCO3调pH值至7.5±0.1；将感染后细胞置35℃恒温培养箱培养至病毒复制高峰；经0.25%胰蛋白酶消化，进行细胞计数；加入含1%谷氨酰胺5%新生牛血清pH值7.4±0.1的MEM培养液，调节细胞浓度至1.2~1.8×105/ml，制备细胞悬液；将细胞悬液滴入12孔载玻片中，每孔20~25μl，将载玻片置于湿盒中，放35℃、5%CO₂培养箱孵育30分钟后，PBS漂洗1次，自然晾干，直接用冷丙酮室温固定15分钟，取出后，直接放入片盒中，-20℃保存。