[发明专利]有氧下可提升重组蛋白质表现的菌株有效
| 申请号： | 201410553469.8 | 申请日： | 2014-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN104371964B | 公开（公告）日： | 2017-11-28 |
| 发明（设计）人： | 赵云鹏;姜中人;何宜静;王祉雯 | 申请（专利权）人： | 逢甲大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/09;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所31272 | 代理人： | 吴俊 |
| 地址： | 中国台湾台*** | 国省代码： | 台湾;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 有氧 提升 重组 蛋白质 表现 菌株 | ||
1.一种有氧下提升重组蛋白质表现的方法，其特征在于，包括：
于有氧下培养一大肠杆菌菌株于一含葡萄糖、甘油、与阿拉伯糖的培养基；
其中，该大肠杆菌菌株包括：
至少一非内源启动子，可操作地连接至该大肠杆菌菌株的染色体上的glpF基因、gldA基因、dhaKLM基因操纵组、araE基因、galP基因、及glk基因；
一araBAD启动子，可操作地连接至该染色体上的T7RNA聚合酶基因；以及
一T7启动子，可操作地连接至一重组蛋白质基因；
其中，该大肠杆菌菌株缺少araABD基因操纵组、araFGH基因操纵组、及ptsG基因。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该非内源启动子选自于由EM7启动子、Trc启动子、及λ噬菌体PR启动子所组成的群组。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该连接至glpF基因的非内源启动子为Trc启动子，该连接至gldA基因的非内源启动子为λ噬菌体PR启动子，该连接至dhaKLM基因操纵组的非内源启动子为λ噬菌体PR启动子，该连接至galP基因的非内源启动子为Trc启动子，而该连接至glk基因的非内源启动子为λ噬菌体PR启动子。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，该连接至glpF基因的非内源启动子位于该glpF基因的上游区域，该连接至gldA基因的非内源启动子位于该gldA基因的上游区域，该连接至dhaKLM基因操纵组的非内源启动子位于该dhaKLM基因操纵组的上游区域，该连接至galP基因的非内源启动子位于该galP基因的上游区域，而该连接至glk基因的非内源启动子位于该glk基因的上游区域。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该重组蛋白质基因位于该大肠杆菌菌株的染色体上，或位于该大肠杆菌菌株内的一质体中。
6.如权利要求1或5所述的方法，其特征在于，该T7启动子位于该重组蛋白质基因的上游区域。
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