[发明专利]一种抗非洲猪瘟病毒的特异性IgY抗体及制备方法和用途在审
申请号: | 201410553923.X | 申请日: | 2014-10-17 |
公开(公告)号: | CN104262484A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 张彩虹;花群义;刘建利;曹琛福;陶虹;宗卉;杨俊兴;吕建强;高又文;孙洁;曾少灵;廖立珊;唐金明;黄超华 | 申请(专利权)人: | 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 |
主分类号: | C07K16/08 | 分类号: | C07K16/08;C07K16/02;G01N33/569 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 刘杉 |
地址: | 518045 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 非洲 猪瘟 病毒 特异性 igy 抗体 制备 方法 用途 | ||
1.一种抗非洲猪瘟病毒p54蛋白的特异性IgY抗体的制备方法,包括以下步骤:
(1)将非洲猪瘟病毒p54蛋白基因连接在原核表达载体pET-52b(+)3C/LIC上,将所述表达载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,并诱导其表达,获得所述非洲猪瘟病毒重组p54蛋白抗原;
(2)应用(1)所述重组p54抗原免疫产蛋鸡;所述免疫产蛋鸡的方法如下:第一次免疫:将免疫抗原与等量弗氏完全佐剂乳化,抗原免疫剂量为200μg/只;
第二次免疫:第一次免疫后14d,将免疫抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化,抗原免疫剂量为200μg/只;
第三次免疫:第二次免疫后14d,将免疫抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化,抗原免疫剂量为200μg/只;
第四次免疫:第三次免疫后30d,直接注射免疫抗原,不使用佐剂,抗原免疫剂量为200μg/只;
(3)收集鸡蛋,分离蛋黄,提取卵黄免疫球蛋白,所述卵黄免疫球蛋白中即含有特异性的抗非洲猪瘟病毒p54蛋白的IgY抗体。
2.根据权利要求1所述的方法制备获得的抗非洲猪瘟病毒p54蛋白的特异性IgY抗体。
3.权利要求2所述的抗非洲猪瘟病毒p54蛋白在检测非洲猪瘟病毒抗体的应用。
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