[发明专利]酮苯丙氨酸钙中杂质含量的检测方法

权利要求书

1.一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，具体步骤为：

称取酮苯丙氨酸钙原料药适量，加水超声溶解，用水稀释成酮苯丙氨酸钙浓度为1mg·mL^-1的供试品溶液；

称取苯乙酸对照品适量，加水超声溶解，用水稀释成苯乙酸浓度为20μg·mL^-1的对照品溶液；

按照以下色谱条件对供试品溶液进行分析，按外标法以峰面积计算苯乙酸含量；

色谱条件为：

(1)色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；

(2)流动相：磷酸调节至pH 3.3的20mmol·L^-1磷酸二氢钾：乙腈＝85:15v/v为流动相等度洗脱；

(3)流速：1mL·min^-1；

(4)检测波长：205nm；

(5)柱温：30℃；

(6)进样量：10uL。

2.根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其特征在于，其中所述十八烷基硅烷键合硅胶柱的型号为Agilent XDB C₁₈色谱柱。

3.根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其特征在于，其中所述的苯乙酸，在酮苯丙氨酸钙原料药中含量不得超过0.2％。

4.根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其特征在于，其中所述的苯乙酸对照品的制备方法为：

(1)制备方法：取酮苯丙氨酸钙原料药，加入0.5％的H₂O₂，室温放置2h，加适量水，超声溶解，采用液相色谱分离制备该苯乙酸杂质；收集30-35min含有目标物的洗脱液，合并，60℃减压浓缩至一定量，冷冻干燥3d，进一步除去甲酸铵，得白色片状固体，重结晶，得苯乙酸对照品；

(2)色谱条件为：用YMC-Pack ODS-A色谱柱，以甲酸调pH至4.0的10mmol·L^-1甲酸铵溶液：乙腈＝85:15V/V为流动相等度洗脱，流速为10mL·min^-1，检测波长205nm，柱温为30℃，进样量为2mL。

5.根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其特征在于，以峰面积Y对质量浓度X作图，线性方程Y＝37.237X-5.11，相关系数r为0.9995，苯乙酸在0.65～5.82μg·mL^-1的范围内。

6.根据权利要求1至5任一所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其特征在于，所述的酮苯丙氨酸钙原料药是由乙内酰脲和苯甲醛反应制得。