[发明专利]一种能够快速区分猪圆环病毒1型(PCV1)和2型(PCV2)的多重PCR诊断方法和专用试剂盒

权利要求书

1.一组用于对圆环病毒进行分型检测的引物组，所述引物组包括特异性引物L1、L2、L3，其中：

L1：5′-TATTACCGGCGCACTTCGGCAGCG-3′

L2：5′-TCACTCCGTTGTCCCTGAGATCT-3′

L3：5′-TCTTCCAAACCTTCCTCTCCGCAA-3′。

2.包含权利要求1所述引物组的圆环病毒分型检测试剂盒。

3.如权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸提取试剂、PCR扩增试剂、和/或琼脂糖凝胶电泳试剂。

4.一种圆环病毒分型检测方法，其特征在于，使用权利要求1所述的引物组进行PCR检测，退火温度为55℃。

5.如权利要求4所述的分型检测方法，其包括以下步骤：

(1)可选的，核酸提取步骤；

(2)PCR扩增步骤：

(3)可选的，琼脂糖凝胶电泳检测步骤。

6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，还包括对琼脂糖凝胶电泳的结果进行分析的步骤，如扩增片段约为404bp，则样本中的圆环病毒为猪圆环病毒II型(PCV2)；如扩增片断大小约为198bp，则样本中的圆环病毒为猪圆环病毒I型(PCV1)。

7.如权利要求5或6所述的检测方法，其特征在于，还包括对PCR扩增产物进行测序验证的步骤。

8.如权利要求5或6所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)的PCR扩增的条件为：95℃5min；94℃40S，55℃40S，72℃40S，共30个循环；72℃10min。