[发明专利]一种用于检测诺卡氏菌的核苷酸序列及应用无效
| 申请号： | 201410562243.4 | 申请日： | 2014-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN104263844A | 公开（公告）日： | 2015-01-07 |
| 发明（设计）人： | 李振军;孙渭歌 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京市众天律师事务所 11478 | 代理人： | 李新军 |
| 地址： | 102206 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 诺卡氏菌 核苷酸 序列 应用 | ||
1.一种用于细菌检测的探针序列，所述序列为SEQ ID NO:3所示。
2.一种用于非诊断目的的荧光TaqMan PCR检测方法，所述方法包括：
(1)被检测物种的基因组DNA的抽提；
(2)以步骤(1)获得的DNA为模板进行TaqMan PCR扩增，其中上游引物为SEQ ID NO:1所示的序列，下游引物为SEQ ID NO:2所示的序列，探针序列为SEQ ID NO:3所示的序列；
(3)对扩增结果进行检测分析。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)的PCR反应条件为：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)和(3)在ABI 7500Fast实时荧光定量PCR仪中进行。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述物种为细菌。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述细菌选自下述细菌：诺卡氏菌、嗜肺军团菌、肺炎克雷伯、肺炎链球菌、百日咳杆菌、分枝杆菌、小肠耶尔森菌、艰难梭菌。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述细菌为诺卡氏菌。
8.一种用于细菌检测的TaqMan PCR试剂盒，所述试剂盒包括：
(1)热启动Taq DNA聚合酶；
(2)实时荧光定量PCR缓冲液；
(3)序列为SEQ ID NO:1的上游引物为和序列为SEQ ID NO:2的下游引物；
(4)序列为SEQ ID NO:3的探针。
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