[发明专利]一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法有效
申请号: | 201410562605.X | 申请日: | 2014-10-21 |
公开(公告)号: | CN104372061B | 公开(公告)日: | 2018-04-06 |
发明(设计)人: | 程俊文;贺亮;胡传久;魏海龙;付立忠;李海波;邹景泉 | 申请(专利权)人: | 浙江省林业科学研究院 |
主分类号: | C12P39/00 | 分类号: | C12P39/00;C12P19/04;C12R1/645 |
代理公司: | 浙江永鼎律师事务所33233 | 代理人: | 郭小丽 |
地址: | 310023 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 富锌桑黄 液体 发酵 产物 制备 方法 | ||
1.一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法,其特征在于,包括步骤:
(1)富锌桑黄液体种子液制备:将活化后的桑黄菌种接入液体种子培养基中进行桑黄液体种子培养,在桑黄液体种子培养第1天-第4天,将培养基置于低频超声环境中,超声波频率为10KHz-100KHz,超声波强度控制在0.1W/cm3-0.9W/cm3,22℃-28℃恒温,保持120r/min-150r/min振荡培养1天-8天后,得到富锌桑黄液体种子液;所述的液体种子培养基中含有富锌酵母0.04%-0.4%和分心木提取物0.05%-0.4%,%为质量百分比;
(2)富锌桑黄的液体发酵培养:将步骤(1)中的富锌桑黄液体种子液按占液体发酵培养基体积5%-20%的用量接入液体发酵培养基中进行桑黄液体发酵培养,在桑黄液体发酵培养第2天-第4天,将液体发酵培养基置于极低频交变磁场环境中,磁场强度0.4mT-5mT,交变磁场频率5Hz-50Hz,22℃-28℃恒温,保持140r/min-160r/min振荡培养2天-5天后,得到富锌桑黄发酵产物;所述的液体发酵培养基中含有富锌酵母0.04%-0.4%和星油藤叶酶解物0.05%-0.4%,%为质量百分比;
所述的分心木提取物的制备方法包括:称取一定量的分心木,粉碎,先加占分心木重量10倍量-16倍量的质量百分浓度为60%-80%的乙醇水溶液在60℃-80℃浸提1h-2h,过滤后得到上清液,上清液浓缩后真空冷冻干燥得提取物Ⅰ;上述醇提后的分心木残渣加入占分心木重量10倍量-20倍量的水在85℃-95℃下浸提1h-2.5h,过滤后得到上清液,上清液浓缩至1/4体积后加入浓缩物体积2倍量-5倍量的无水乙醇,离心收集沉淀物,沉淀物真空冷冻干燥后得提取物Ⅱ,合并上述提取物Ⅰ和提取物Ⅱ得分心木提取物;
所述的星油藤叶酶解物的制备方法,包括:将星油藤叶加水磨成浆液,灭酶;调节浆液pH4.0-5.5,加入由纤维素酶和果胶酶构成的第一复合酶,在40℃-50℃进行酶解反应0.5小时-1.5小时,灭酶后调节浆液pH5.0-7.0,加入由木瓜蛋白酶和中性蛋白酶构成的第二复合酶,于50℃-60℃进行酶解反应1小时-1.5小时,灭酶后离心,上清液经过滤、浓缩和干燥,得到星油藤叶酶解物。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述的液体种子培养基质量百分比组成为:葡萄糖1%-2%、富锌酵母0.04%-0.4%、分心木提取物0.05%-0.4%、KH2PO40.1%-0.2%、MgSO4 0.05%-0.1%和余量的水。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的液体发酵培养基质量百分比组成为:葡萄糖1%-2.5%、富锌酵母0.04%-0.4%、星油藤叶酶解物0.05%-0.4%、KH2PO40.1%-0.2%、MgSO4 0.05%-0.1%和余量的水。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的第一复合酶与星油藤叶的质量比为1:30-50;所述的第二复合酶与星油藤叶的质量比为1:25-60。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的纤维素酶与果胶酶的质量比为1:2至4:1;所述的木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的质量比为1:3至2:1。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的富锌酵母中锌含量为400mg/kg-1000mg/kg。
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