[发明专利]一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程领域，具体涉及一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法。

背景技术

桑黄(Phellinus igniarius)属担子菌亚门，层孔菌纲，锈革孔菌科，针层孔菌属。桑黄菌提取物在抑制癌细胞转移和防止癌症手术后复发等的临床应用中具有显著效果，是目前国际公认的生物治癌药剂中有效率最高的一种药用真菌。作为目前国际公认的抗癌效果最好的大型药用真菌，桑黄抑制肿瘤的研究主要集中在药理活性成分桑黄多糖上。

锌是微量元素的一种，在人体内的含量以及每天所需摄入量都很少，但对机体的性发育、性功能、生殖细胞的生成却能起到举足轻重的作用，故有“生命的火花”与“婚姻和谐素”之称。人体正常含锌量为2-3克。绝大部分组织中都有极微量的锌分布，其中肝脏、肌肉和骨骼中含量较高。锌是体内数十种酶的主要成分；锌还与大脑发育和智力有关。人体的睾丸、前列腺、精液当中，都含有高浓度的锌。当人体内锌的含量缺乏时，性功能会因此而低下，合成睾丸素酶发生紊乱，男子将会引起阳痿和脸上生长痤疮。锌对激发精子活动有着特殊的作用，缺锌会造成精子活动力的下降。长期处于缺锌状态而未能及时补充，可出现精子数量明显减少、睾丸萎缩，最后导致不育。

据报道，食用菌对锌元素的富集转化作用较强，是锌元素的优良载体生物。目前已有报道，多种食药真菌对锌具有富集作用且富锌后其药理活性增强。

中国专利ZL200810157380.4公开了一种富锌蛹虫草菌丝体的人工培养方法及其培养基，其培养基配方重量比组分为：葡萄糖1.0％-3.0％，蛋白胨0.5％-1.0％，酵母提取物0.1％-1.0％，琼脂粉1.0％-2.0％，水余量，其pH值为5.0-7.5，其人工培养方法包括试管斜面菌种培养(活化)→试管液体菌种培养→三角瓶液体种子培养→种子罐培养→发酵罐培养→板框过滤→粉碎→真空干燥→粉碎→粉末状菌丝体步骤。其操作简单，培养周期短，菌丝体产率高，无污染无废弃物，具有补锌功能，可以进行工厂化生产。

中国专利ZL200610098121.X公开了一种富锌亮菌多糖，由亮菌在富含锌的液体培养基中经静态发酵培养制备的富锌亮菌菌索中提取得到的多糖，为无定形灰色粉末，提取率达14％，其多糖含量75％-80％，有机锌含量105-135mg/g。实验结果表明，本多糖无毒，能促进受辐射损伤的造血系统和免疫系统功能的恢复，具有抗辐射作用，可应用于制备抗辐射药品或保健食品。

上述技术一般仅单一采用液态发酵方式，简单地模仿常规食药用菌菌丝体发酵的方式，以蛋白胨、酵母提取物为氮源，以蔗糖、葡萄糖或玉米粉为主要碳源，在培养基中添加硫酸锌等无机锌为主的锌源。由于食药用菌液体培养时间有限，无机锌等一般不容易被菌丝体吸收，导致发酵液中的有机锌、锌多糖等有效组分含量不高。

目前在生物技术领域的科研与生产上，生活细胞，无论是自养细胞还是异养细胞，其人工培养的控制条件大都集中在培养基组成、温度、通(空)气、酸碱度、氧化还原电位、离子浓度等。利用这些传统的控制因子研究各种生活细胞的培养技术以获得目的次生代谢产物一直是生物技术领域的研究热点。

然而，生活细胞生长与次生代谢的调控因子远远不止这些。大量的科学研究证明：生物细胞的营养生长和次生代谢产物积累都受到特定波长或频率的电磁波等的调节，例如：一定频率和功率的超声波可以激活细胞并对生活细胞生长与代谢具有积极的促进作用、特殊波长的光源会有效地调节生活细胞某些特殊的代谢途径而导致一些生物活性物质的积累、一定强度的磁场可以促进生活细胞的生长与代谢。

对生活细胞具有显著调控效应的这些物理因子可用于提高工业化生产人类需要的生物活性物质或者药物的效率。由于不同波长的电磁波都具备一定的能量和频率，且只能被生活细胞内某些特殊的波敏色素或者其它波敏物质(如某些辅酶或者非酶蛋白质受体)吸收而使基因表达或相应的代谢网络发生变化，由此引起某些特定的次生代谢产物表达量增加。或者超声波引起的机械振动和高速传质而促进细胞代谢和次生代谢产物的分泌。或者磁场引起生物大分子的氢键磁性和能量变化而导致生物大分子(酶)的活性增强。

目前国内外关于以特定低频率磁场和低频率超声波为主辅助提高桑黄发酵富锌产物产量及活性的方法还没有相应的报道。

发明内容

本发明为了解决现有技术所存在的技术问题，提供了一种富锌桑黄液体发酵产物的制备方法，该方法通过外源添加物以及低频率磁场和低频率超声波辅助提高桑黄发酵富锌产物产量及活性，可明显提高有机锌和锌多糖含量和活性，具有安全可靠的特点。

本发明采用的技术方案是：