[发明专利]一种液相色谱法检测牛奶中磺胺类药物残留的样品前处理方法及检测方法

权利要求书

1.一种液相色谱法检测牛奶中磺胺类药物残留的样品前处理方法，其特征在于，包括：

取1至5克待测牛奶样品，加入10至30mL乙腈，涡旋混合1至5分钟，再于8000至10000转/分钟离心3至5分钟，取上清液；并向离心后的残渣中加入乙腈10至30毫升，涡旋混合1至5分钟，再于8000至10000转/分钟离心3至5分钟，取上清液；合并两次所得的上清液；

将合并后的所述上清液置于旋蒸瓶中，在40至50℃下旋转蒸发至干；再依次用0.1至0.2mol/L盐酸水溶液2至5mL、0.1至0.2mol/L盐酸水溶液2至5mL、正己烷3至5mL和正己烷3至5mL分别清洗旋蒸瓶；所得清洗液合并至同一离心管中，涡旋混合30至120秒，再于8000至10000转/分钟离心3至5分钟；离心后弃正己烷层，取下层液；

将所述下层液用MCX固相萃取柱净化，得到净化液；以及

将所述净化液于40至50℃氮气吹干，再用0.1%甲酸乙腈溶液1.0至5mL溶解；其中所述0.1%甲酸乙腈溶液的配制方法为：取0.1%甲酸水溶液830mL，用乙腈溶解并稀释至1000mL。

2.如权利要求1所述的样品前处理方法，其中，所述用MCX固相萃取柱净化的步骤为：

先将MCX固相萃取柱依次用甲醇2至5mL和0.1mol/L盐酸水溶液2至5mL活化；

将所述下层液过活化后的MCX固相萃取柱，控制流速1至2mL/分钟；

依次用0.1至0.2mol/L盐酸水溶液1至2mL和50%甲醇乙腈溶液2至4mL淋洗MCX固相萃取柱；所述50%甲醇乙腈溶液的配制方法为：取甲醇50mL，用乙腈溶解并稀释至100mL；以及

最后用4mL洗脱液洗脱，所述洗脱液的配制方法为：取氨水5mL，用甲醇溶解并稀释至100mL。

3.如权利要求1所述的样品前处理方法，其中，所述磺胺类药物包括：磺胺醋酰、磺胺吡啶、磺胺噁唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺异噁唑、磺胺甲噁唑、苯酰磺胺和磺胺二甲氧哒嗪。

4.一种液相色谱法检测牛奶中磺胺类药物残留的方法，其特征在于，先根据权利要求1所述的样品前处理方法对待测牛奶样品进行前处理，再用液相色谱法进行检测。

5.如权利要求4所述的液相色谱法检测牛奶中磺胺类药物残留的方法，其中，液相色谱的色谱条件为：

柱温箱：30至45℃；

紫外检测器检测波长：270nm；

进样量：20至50μL；

色谱柱：C18或C8，规格为250×4.6mm，5μm；

流动相：0.1%甲酸水溶液和乙腈；

流速：1.0至1.5mL/分钟；

洗脱梯度：

时间，min0.1%甲酸水溶液，%乙腈，%0.0078至8812至225.0078至8812至2210.0075至8515至2522.3055至6535至4522.405至1585至9530.005至1585至9531.0078至8812至2248.0078至8812至22

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